DiO (Synonyms: DiOC18(3); 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate) |
| Catalog No.GC19515 |
DiO (3,3′-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate) est un colorant fluorescent carbocyanine à chaîne longue lipophile qui est largement utilisé en tant que Di pour marquer les cellules, les organites, les liposomes, les virus et les lipoprotéines.
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Cas No.: 34215-57-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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DiO (3,3′-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate) est un colorant fluorescent carbocyanine à chaîne longue lipophile qui est largement utilisé en tant que Di pour marquer les cellules, les organites, les liposomes, les virus et les lipoprotéines. 3,3′-Octadecyloxacarbocyanine perchlorate est un traceur lipophile fluorescent vert faiblement fluorescent dans l'eau mais fortement fluorescent et comparable lorsqu'il est incorporé dans les membranes qui peuvent être photographiés. 3,3′-Octadecyloxacarbocyanine perchlorate est utilisé en tant que marqueur fluorescent pour les cellules vivantes et en tant que colorant lipophile pour le marquage des embryons de poisson zèbre[1].
Les carbocyanines à chaîne longue qui comprennent DiO, DiI, DiD, DiR, et le colorant dialkylaminostyrène DiA pour le marquage des membranes et d'autres structures hydrophobes. Le fluorochrome DiO présente une fluorescence pronocée, ce qui facilite l'imagerie multicolore et l'analyse au moyen de cytométrie en flux des cellules vivantes[2]. DiO peut être utilisé avec des filtres FITC standard.
References:
[1]. Anat Samuel, et al. Six3 regulates optic nerve development via multiple mechanisms. 2016 Jan 29;6:20267. doi: 10.1038/srep20267.
[2]. Bhowmik BB, et al. Photophysical studies of 3,3' dioctadecyloxacarbocyanine dye in model biological membranes and different solvents. Chem Phys Lipids. 2001 Feb;109(2):175-83.
Ce protocole fournit seulement une guide et doit être modifié en fonction de vos besoins spécifiques.
1.Solution de marquage de ma membrane cellulaire DiO
(1)Préparer une solution de stock DMSO ou EtOH : utiliser DMSO ou EtOU en tant que solution de stock à la concentration de 1-5mM.
Remarque : Conserver la solution de stock non-utilisé en aliquotes à -20°C loin de lumière et éviter répéter les cycles de congélation/décongélation.
(2)Préparation de la solution de travail : Diluer la solution de stock avec un tampon approprié (par exemple : milieu sans sérum, HBSS ou PBS) pour préparer une solution de travail à la concentration de 0.5-5 μM.
Remarque : La concentration finale de la solution de travail est préparée en fonction de l'expérience. Les conditions optimales peuvent être trouvées à partir de plus de dix fois la concentraion recommandée.
2.Marquage des cellules en suspension
(1)Centrifuger les cellules en suspension à 1000g pendant 3-5 minutes à 4°C et éliminer le surnageant. Laver deux fois avec PBS pendant 5 minutes à chaque fois.
(2)Ajouter 1mL de solution de travail DiO et incuber à la température ambiante pendant 5-30 minutes. Le temps d'incubation optimal est différent pour différentes cellules.
(3)Centrifuger le tube à essai contenant les cellules marquées à 000~1500 rpm pendant 5 minutes.
(4)Centrifuger à 400g pendant 3-4 minutes à 4°C et éliminer le surnageant. Verser le surnageant et ajouter PBS pour laver deux fois, 5 minutes à chaque fois.
(5)Résuspendre les cellules avec un substrat cellulaire sans sérum ou PBS. Observer au microscope à fluorescence ou au moyen de cytométrie en flux.
3.Marquage des cellules adhésives
(1)Cultiver les cellules adhérentes sur les lamelles de verre stériles.
(2)Retirer la lamelle de verre du milieu, aspirer l'excès de milieu et placer la lamelle de verre dans un environnement humide.
(3)Ajouter 100uL solution de travail de colorant depuis un angle de la lamelle de verre et agiter délicatement pour que le colorant couvre uniformément toutes les cellules.
(4)Incuber à la température de chambre pendant 5-30 minutes, le temps d'incubation optimal est différent pour différentes cellules.
(5)Eliminer la solution de travail de colorant et laver la lamelle de verre 2-3 fois avec le substrat.
4.Examen microscopique : la lumière d'excitation/émission de DiO est respectivement 484/501nm.
Remarque :
1) Les colorants fluorescents ont des problèmes de quenching, veuillez essayer d'éviter la lumière pour ralentir le quenching de la fluorescence.
2)Pour votre sécutité et votre santé, veuillez proter un blouse de laboratoire et les gants jetables lors de l'opération.
| Cas No. | 34215-57-1 | SDF | |
| Synonymes | DiOC18(3); 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate | ||
| Canonical SMILES | O=Cl(=O)([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCCN1C(C=CC=C2)=C2O/C1=C/C=C/C(OC3=C4C=CC=C3)=[N+]4CCCCCCCCCCCCCCCCCC | ||
| Formula | C₅₃H₈₅ClN₂O₆ | M.Wt | 881.7 |
| Solubility | DMF : 10 mg/mL (11.34 mM; Need ultrasonic); DMSO : 5 mg/mL (5.67 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | Storage | Store at 4°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.1342 mL | 5.6709 mL | 11.3417 mL |
| 5 mM | 226.8 μL | 1.1342 mL | 2.2683 mL |
| 10 mM | 113.4 μL | 567.1 μL | 1.1342 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 11 reference(s) in Google Scholar.)
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