Biotin-16-UTP |
| Catalog No.GB20150 |
Biotin-16-UTP est UTP biotine-étiqueté qui est utilisé dans la transcription in vitro pour préparer les sondes de RNA.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 280549-77-1 (free acid)
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Biotin-16-UTP est UTP biotine-étiqueté qui est utilisé dans la transcription in vitro pour préparer les sondes de RNA[1]. Biotin-16-UTP est un substrat actif pour la polymérase de RNA et peut être incorporé par les polymérases variées de RNA (celles comprennent les polymérases SP6, T3, et T7 RNA) pour former RNA étiqueté[2, 3]. Biotin-16-UTP-étiqueté de RNA peut être détecté par les molécules rapporteuses liées à la streptavidine, à l'avidine ou aux anticorps anti-biotine[4, 5]. Biotin-16-UTP peut être utilisé dans les recherches d'hybridation moléculaire et d'interation RNA-protéine[6].
References:
[1]McKenney K M, Connacher R P, Dunshee E B, et al. Chemi-Northern: a versatile chemiluminescent northern blot method for analysis and quantitation of RNA molecules[J]. RNA, 2024, 30(4): 448-462.
[2]Chien H, Alston C I, Dix R D. Suppressor of cytokine signaling 1 (SOCS1) and SOCS3 are stimulated within the eye during experimental murine cytomegalovirus retinitis in mice with retrovirus-induced immunosuppression[J]. Journal of Virology, 2018, 92(18): 10.1128/jvi. 00526-18.
[3]Chen M, Zhang L, Guo Y, et al. A novel lncRNA promotes myogenesis of bovine skeletal muscle satellite cells via PFN1‐RhoA/Rac1[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(13): 5988-6005.
[4]Ritchey B, Hai Q, Han J, et al. Genetic variant in 3’untranslated region of the mouse pycard gene regulates inflammasome activity[J]. Elife, 2021, 10: e68203.
[5]Bratthauer G L. The avidin–biotin complex (ABC) method and other avidin–biotin binding methods[J]. Immunocytochemical methods and protocols, 2010: 257-270.
[6]Siprashvili Z, Webster D E, Kretz M, et al. Identification of proteins binding coding and non-coding human RNAs using protein microarrays[J]. BMC genomics, 2012, 13: 1-13.
Ce protocole ne fornit qu'une guide, veuillez le modifier pour correspondre vos besoins spécifiques.
1.Préparation de la solution
(1)Solution de stock : Ce produit est fourni sous forme de solution de stock à 10mM.
Note : Après la répartition uniforme de la solution de stock non-utilisée, la stocker à -20°C ou -80°C en obscurité afin d''éviter répeter la congéler et la décongeler .
(2)Solution de travail : Diluer la solution de stock par le tampon expérimental pour préparer une concentration de travail de 0,5mM.
Remarque : Veuillez ajuster la concentration de la solution en fonction de la situation réelle et la préparer avant utilisation.
2.Préparation de la sonde de RNA avec Biotin-16-UTP[1](c'est extrait de la litérature, fournir seulement une référence)
1.Préparation de RNA modèle : Dans un tube à essai de 0,5mL, ajouter 1µg DNA modèle purifié ou 4µL DNA de témoin à l'eau stérile, traité par diéthylpyrocarbonate, et sans RNase (DEPC), et le volume total de l'échantillon est 13µL.
(2)Préparation de système de réaction de transcription in vitro : Pour chaque échantillon, ajouter 2µL mélange de triphosphates de déoxynucléosides 10×, 2µL tampon de transcription 10×, 1µL inhibiteur de RNase protecteur et 2µL polymérase de RNA SP6 ou polymérase de RNA T7.
(3)Réaction d'étiquetage : Ajouter Biotin-16-UTP (la concentration finale est généralement 0,5mM) et incuber à 37°C pendant 2h pour préparer la sonde de RNA.
(4)Arrêt de la réaction : Ajouter 2mL DNase sans ARNase à chaque tube pour retirer DNA modèle et incuber à 37°C pendant 10 minutes. Ajouter 2mL EDTA (pH 8.0) 0,2M à chaque tube pour arrêter la réaction de DNase.
(5) Isolation de la sonde de RNA : Isoler la sonde de RNA par précipitation au chlorure de lithium et remettre en suspension dans 25µL eau DEPC.
References:
[1] Bharati B K, Swetha R K, Chatterji D. Identification and characterization of starvation induced msdgc-1 promoter involved in the c-di-GMP turnover[J]. Gene, 2013, 528(2): 99-108.
| Cas No. | 280549-77-1 (free acid) | SDF | |
| Formula | C32H52N7O19P3S (free acid) | M.Wt | 963.8 (free acid) |
| Solubility | Storage | Store at -20°C or below,always avoid freeze-thaw cycles and avoid direct sunlight. | |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >99.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 30 reference(s) in Google Scholar.)
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