DiO (Synonyms: DiOC18(3); 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate) |
| Catalog No.GC19515 |
DiO（3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate）는 세포, 세포 기관, 리포좀, 바이러스, 및 렙로프로틴을 표시하기 위해 널리 사용되는 친지성 장사이클 카보시안 형광욤료이다.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 34215-57-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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DiO（3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate）는 세포, 세포 기관, 리포좀, 바이러스, 및 렙로프로틴을 표시하기 위해 널리 사용되는 친지성 장사이클 카보시안 형광욤료이다. 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate은 물에 약한 형광을 발하지만 막에서 광안정성에 결합되면 매우 형광성이 높고 비교할 수 있다. 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate은 살아있는 세포의 형광 표식으로 사용되고 장어 알을 표시하기 위한 친지성 염료로 사용된다[1].
장사이클 카보시안 염료에는 DiO, DiI, DiD, DiR 및 멤브레인과 기타 친수성 구조를 표시하기 위한 다이알킬아미노스티렌 염료 DiA가 포함된다. DiO 형광체는 선명한 형광을 발하여 살아있는 세포의 멀티칼러 영상화와 유세포 분석을 용이하게 한다[2]. DiO는 표준 FITC 필터와 함께 사용할 수 있다.
References:
[1]. Anat Samuel, et al. Six3 regulates optic nerve development via multiple mechanisms. 2016 Jan 29;6:20267. doi: 10.1038/srep20267.
[2]. Bhowmik BB, et al. Photophysical studies of 3,3' dioctadecyloxacarbocyanine dye in model biological membranes and different solvents. Chem Phys Lipids. 2001 Feb;109(2):175-83.
이 프로토콜은 가이드를 제공하는 것만으로서 특정한 요구에 따라 수정되어야 합니다.
1.DiO 세포막 염색 용액
(1). DMSO나 EtOH 보관용액 준비: DMSO나 EtOH를 사용하여 1-5mM의 농도로 보관용액을 준비합니다.
참고: 사용하지 않은 재고 용액을 -20°C의 어두운 곳에 분사하여 보관하고 반복되는 냉동과 해동을 피하세요.
(2). 작업용액 준비: 적절한 버퍼액(예: 무혈청은 매체, HBSS 혹은 PBS 등)으로 재고용액을 희석하여 0.5-5 μM의 농도로 작업용액을 준비합니다.
참고: 작업 용액의 최종 농도는 다양한 세포와 실험의 경험에 따라 준비됩니다. 최적 조건은 추천 농도의 10배 이상에서 찾을 수 있습니다.
2.소생된 세포 염색
(1). 4°C에서 1000g으로 정지된 세포를 3-5분간 원심 분리하고 상청액을 버립니다. PBS로 두 번 세척고 매번 5분간 진행합니다.
(2). DiO 작업용액 1mL을 추가하고 실온에서 5-30분간 재배합니다. 다양한 세포에 대해 최적의 재배 시간은 다릅니다.
(3). 염색된 세포 시험관을 1000~1500 rpm으로 5분간 원심 분리합니다.
(4). 4°C에서 400g으로 3-4분간 촘전시켜 상청액을 버리고 상청액을 붓어내고 PBS로 두 번 세척고 매번 5분간 진행합니다.
(5). 무혈청은 세포 배양액이나 PBS로 세포를 소생시킵니다. 형광 현미경이나 유세포 분석기로 관찰합니다.
3. 점착 세포 염색
(1). 멸균된 슬라이드에 고착세포를 배양합니다.
(2). 배양액에서 슬라이드를 제거하고 배양액을 빼내고 슬라이드를 습한 환경에 놓습니다.
(3). 슬라이드의 한 구석에 100μL의 염료 작업용액을 추가하고 살짝 흔들어 염료가 모든 세포를 균등하게 덮도록 합니다.
(4). 실온에서 5-30분 동안 재배하고 다양한 세포에 대해 최적의 재배 시간은 다릅니다.
(5). 염료 작업용액을 버리고 배양액으로 슬라이드를 2~3번 세척합니다.
4.현미경 검사: DiO의 자극/발광광은 각각 484/501nm입니다.
참고:
1)형광 염료에는 개질 문제가 있고 형광 개질을 늦추기 위해 빛을 피하시기 바랍니다.
2)안전과 건강을 위해 작업 시 실험복과 일회용 장갑을 착용하시기 바랍니다.
| Cas No. | 34215-57-1 | SDF | |
| Synonyms | DiOC18(3); 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate | ||
| Canonical SMILES | O=Cl(=O)([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCCN1C(C=CC=C2)=C2O/C1=C/C=C/C(OC3=C4C=CC=C3)=[N+]4CCCCCCCCCCCCCCCCCC | ||
| Formula | C₅₃H₈₅ClN₂O₆ | M.Wt | 881.7 |
| Solubility | DMF : 10 mg/mL (11.34 mM; Need ultrasonic); DMSO : 5 mg/mL (5.67 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | Storage | Store at 4°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.1342 mL | 5.6709 mL | 11.3417 mL |
| 5 mM | 226.8 μL | 1.1342 mL | 2.2683 mL |
| 10 mM | 113.4 μL | 567.1 μL | 1.1342 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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