Guanylyl Imidodiphosphate (lithium salt) (Synonyms: Gpp(NH)p lithium) |
| Catalog No.GC43798 |
Guanylyl Imidodiphosphate (lithium salt)은 안정적인 GTP 유사체로 아데닐산환화효소의 강력한 활성제이다.
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Cas No.: 64564-03-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Guanylyl Imidodiphosphate (lithium salt)은 안정적인 GTP 유사체로 아데닐산환화효소의 강력한 활성제이다. Guanylyl Imidodiphosphate은 소의 전두엽 뇌피질막에서의 α-교감신경수용체와의 (±)-[3H] 에피네프린 및 (-)-[3H] 노르에피네프린 결합을 감소시키고IC50 값은 1-10μM 범위를 보인다[1]. Guanylyl Imidodiphosphate은 트리튬화된 작용제의 고친화력 결합을 선택적이고 강력하게 억제하고 IC50 값은 0.1µM이다[2-3].
체외 실험에서 Guanylyl Imidodiphosphate과 GTP는 수컷 레인저 균주 병아리（우스터, 로스 가금류）의 신장 혈장막에서의 아데노신산 순환효소（EC4.6.1.1）의 효소 활성을 현저하게 증가시켰다[4-5]. Guanylyl Imidodiphosphate은 12분 편광 후 3.1μM 농도에서 EC50을 달성했고 기초 수준에 비해 아데닐산환화효소의 효소 활성을 8.2배（720%）증가시켰다[5]. Guanylyl Imidodiphosphate은 제노푸스 난자 추출물에서의 핵막 조립을 농도에 따라 억제했다. 3mM 농도에서 Guanylyl Imidodiphosphate은 160분 동안 양쪽 소포 융합과 핵막 형성을 완전히 차단했다. 1mM 농도로 사용할 때 Guanylyl Imidodiphosphate은 세포질 추가 후 80분 동안 소포체 융합의 개시를 지연시켰고 핵막 팽창을 현저하게 억제해서 핵막의 성장률을 6배 이상 감소시켰다[6].
References:
[1] U'Prichard D C, Snyder S H. Guanyl nucleotide influences on 3H-ligand binding to α-noradrenergic receptors in calf brain membranes[J]. Journal of Biological Chemistry, 1978, 253(10): 3444-3452.
[2] Mollereau C, Pascaud A, Baillat G, et al. 5′-Guanylylimidodiphosphate decreases affinity for agonists and apparent molecular size of a frog brain opioid receptor in digitonin solution[J]. Journal of Biological Chemistry, 1988, 263(34): 18003-18008.
[3] Roy C, LE BARS N C, JARD S. Vasopressin‐Sensitive Kidney Adenylate Cyclase: Differential Effects of Monovalent Ions on Stimulation by Fluoride, Vasopressin and Guanylyl 5′‐imidodiphosphate[J]. European Journal of Biochemistry, 1977, 78(2): 325-332.
[4] ABOU-ISSA H, REICHERT JR L E O E. Modulation of follicle-stimulating hormone-sensitive rat testicular adenylate cyclase activity by guanyl nucleotides[J]. Endocrinology, 1979, 104(1): 189-193.
[5] Hunt N H, Martin T J, Michelangeli V P, et al. Effect of guanyl nucleotides on parathyroid hormone-responsive adenylate cyclase in chick kidney[J]. Journal of Endocrinology, 1976, 69(3): 401-412.
[6] Boman A L, Delannoy M R, Wilson K L. GTP hydrolysis is required for vesicle fusion during nuclear envelope assembly in vitro[J]. The Journal of cell biology, 1992, 116(2): 281-294.
| 세포 실험 [1]: | |
세포 라인 | 제노푸스의 난세포 |
제조 방법 | 제노푸스 난자 추출물은 세포질과 막 분획을 분리하기 위해 연속적인 원심분리 단계를 통해 준비되었습니다. 처음에 젤 제거된 제노푸스 난자는 저속 원심분리(10000g, 12분)를 거쳐 세포질 추출물을 생성했습니다. 이 후에 상청액은 초고속 원심분리(200000g, 1시간, 4°C)를 통해 막과 세포질 성분을 분리했습니다. 세포질 분획은 추가 정제(200000g, 25분)를 거쳤고 액체 질소(-80°C)에서 분할 및 보관하기 전에 ATP 재생 시스템(1 mM ATP, 50 μg/ml 크레아틴 인산화효소, 10 mM 인산염)을 보충했습니다.막 분획은 막 세척 버퍼(MWB)로 희석 후 수소 쿠션(1.3M 수소, 26600g, 15분, 4°C)을 통해 정제되었고 0.5M 수소가 포함된 MWB에서 세포질 부피의 10%에 해당하는 농도로 다시 현탁시켰습니다. 두 분획 모두 25-35 mg/ml의 단백질 농도를 보였습니다. 기능성 실험에서 해동된 막 분획은 세포질과 Guanylyl Imidodiphosphate(lithium salt)(0.1-3 mM)과 함께 23°C에서 30-180분간 배양되었습니다. 사전 배양 후 시료은 Guanylyl Imidodiphosphate(lithium salt)이 포함된 MWB로 희석되고 원심분리(20000g, 15분, 4°C)되었습니다. 처리된 막은 MWB로 원래 부피로 다시 소생시켰고 2㎕의 시료를 1㎕의 부푼 염색질과 30분간 결합시켰습니다. 이후 막 융합 활성을 반응 혼합물에 20㎕의 신선한 세포질을 추가하해서 평가했습니다. |
반응 조건 | 0.1, 1 및 3mM; 60, 120 및 180 분 동안 |
응용 분야 | Guanylyl Imidodiphosphate (lithium salt)은 소포 융합과 핵막 형성을 현저하게 차단했습니다. |
References: | |
| Cas No. | 64564-03-0 | SDF | |
| Synonyms | Gpp(NH)p lithium | ||
| Chemical Name | 5’-guanylic acid, monoanhydride with imidodiphosphoric acid, tetralithium salt | ||
| Canonical SMILES | O[C@H]1[C@H](N2C=NC3=C2N=C(N)NC3=O)O[C@H](COP(OP(NP([O-])([O-])=O)([O-])=O)([O-])=O)[C@H]1O.[Li+].[Li+].[Li+].[Li+] | ||
| Formula | C10H13N6O13P3 • 4Li | M.Wt | 545.9 |
| Solubility | 10mg/mL in PBS, pH7.2 | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.8318 mL | 9.1592 mL | 18.3184 mL |
| 5 mM | 0.3664 mL | 1.8318 mL | 3.6637 mL |
| 10 mM | 0.1832 mL | 0.9159 mL | 1.8318 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
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