X-Gal (Synonyms: BCIG, X-β-Gal, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside) |
| Catalog No.GC15620 |
X-Gal은 β-galactosidase에 의해 분해되어 파란색으로 나타나므로, 종종 트랜스제닉 이식 선별 테스트에 사용된다. 예를 들어, 블루 화이트 스팟 스크리닝이나β-galactosidase의 인 시투 스테이닝 분석에 사용된다.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 7240-90-6
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
_1-3.$$$39978408@51.jpg');)
_1-9.$$$38538795@65.jpg');)
_1-9.$$$39112701@51.jpg');)
_1-7.$$$37316672@70.jpg');)
_366-372.$$$36198801@70.jpg');)
.$$$38565142@65.jpg');)
_1867-1883.$$$33248023@67.jpg');)
_eads6055.$$$39977546@45.jpg');)
_eadm9805.$$$40080571@45.jpg');)
_eadj3020.$$$39666821@45.jpg');)
_1-20.$$$39757301@28.jpg');)
_1-24.$$$38898113@28.jpg');)
_273-287.$$$36806353@46.jpg');)
_1-16.$$$37156877@44.jpg');)
_1-19.$$$37460805@44.jpg');)
_1291-1307.$$$34518654@46.jpg');)
X-Gal은 β-galactosidase에 의해 분해되어 파란색으로 나타나므로, 종종 트랜스제닉 이식 선별 테스트에 사용된다. 예를 들어, 블루 화이트 스팟 스크리닝이나β-galactosidase의 인 시투 스테이닝 분석에 사용된다.
X-gal(1 mg/ml / 0.3 mg/ml) 염색은 또한 단백질 표현 패턴을 분석하는 데 사용된다. 이는 체내 β-galactosidase의 표현 패턴을 감지하는 데 사용될 수 있다[3-4]. X-gal(1 mg/ml)은 또한 쥐의 배아및 성인 쥐에서 LacZ 활동을 시각화하는 데 사용될 수 있다[5-6].
References:
[1]. Green MR, Sambrook J. Screening Bacterial Colonies Using X-Gal and IPTG: α-Complementation. Cold Spring Harb Protoc. 2019 Dec 2;2019(12). doi: 10.1101/pdb.prot101329. PMID: 31792144.
[2]. Trimborn L, Hoecker U,et,al. A Simple Quantitative Assay for Measuring β-Galactosidase Activity Using X-Gal in Yeast-Based Interaction Analyses. Curr Protoc. 2022 May;2(5):e421. doi: 10.1002/cpz1.421. PMID: 35567769.
[3]. Kokubu H, Lim J. X-gal Staining on Adult Mouse Brain Sections. Bio Protoc. 2014;4(5):e1064. doi: 10.21769/bioprotoc.1064. Epub 2014 Mar 5. PMID: 27390760; PMCID: PMC4932900.
[4]. Burn SF. Detection of β-galactosidase activity: X-gal staining. Methods Mol Biol. 2012;886:241-50. doi: 10.1007/978-1-61779-851-1_21. PMID: 22639266.
[5]. Watanabe-Takano H, Fukumoto M, et,al. Protocol for whole-mount X-gal staining combined with tissue clearing in embryo and adult mouse using CUBIC. STAR Protoc. 2022 Jan 20;3(1):101127. doi: 10.1016/j.xpro.2022.101127. PMID: 35118431; PMCID: PMC8792446.
[6]. Gierut JJ, Jacks TE, et,al. Whole-mount X-Gal staining of mouse tissues. Cold Spring Harb Protoc. 2014 Apr 1;2014(4):417-9. doi: 10.1101/pdb.prot073452. PMID: 24692489; PMCID: PMC4169236.
| X-gal저장 구성 프로토콜: |
X-gal 저장 구성:X-gal을 디메틸포름아미드에 녹여 20mg/ml의 저장 용액을 준비합니다. 20그램의 X-gal을 재무하고, 1L의 디메틸포름아미드(DMF)를 추가하여 녹인 후 병에 보관합니다. 이 병은 빛에 의한 손상을 방지하기 위해 알루미늄 호일로 포장되어야 하며, -20℃에서 보관되어야 합니다. X-gal 용액은 세균을 제거하기 위해 걸러내지 않아도 됩니다. |
성체 쥐 뇌 조직 슬라이스에 대한 X-갈 염색 프로토콜[1]：
1. 쥐의 뇌를 분리하고, 4°C에서 4시간 동안 4% PFA/PBS로 후 고정합니다.
2. 고정된 뇌는 PBS로 세 번 헹구됩니다. 그 후, 20% 사탕물에 밤새도록 흡입시키고 (또는 샘플이 잠길 때까지), 그리고 30% 사탕물에 밤새도록 흡입시킵니다. 이 과정은 냉동 보호와 뇌 조직의 냉동 절면 준비를 돕니다.
3. 뇌는 냉동몰드에 O.C.T. 혼합물에 의해 부착되어 -80℃에서 사용할 때까지 보관됩니다.
4. 40μm 두께의 냉동 절면을 냉동절단기에 사용하여 만들어지고, 슬라이드 유리에 부착됩니다.
5. 슬라이드는 방온에서 150ml의 염색 버퍼로 10분 동안 한 번 헹궈집니다.
6. 슬라이드는 5mM의 Kalium Ferricyanide와 5mM의 Kalium Ferrocyanide를 포함하는 염색 버퍼에서 1mg/ml의 X-갈과 37℃에서 색이 나타날 때까지 흡입시킨다. 이는 일반적으로 3시간에서 밤새도록 걸린다. 샘플이 건조되지 않도록 하고, 슬라이드당 100-200μl의 X-갈 용액을 사용한다.
7. 염색된 샘플은 PBS로 세 번 헹구어집니다 (각 5분).
8. 슬라이드는 50%, 75%, 90%, 100%의 에틸논 솔루션 시리즈를 사용하여 탈수됩니다 (각 2분).
9. 슬라이드는 퍼머넌트 마운트로 부착되어 방온에서 보관될 수 있습니다. 샘플은 이제 높은 배율의 영상 촬영을 위해 준비되었습니다.
참고문헌:
[1].Kokubu H, Lim J. X-gal 성체 쥐의; 뇌 부분에 염색.Bio Protoc. 2014;4(5):e1064.doi:10.21769/bioprotoc.1064.Epub 2014년 3월 5일.PMID:27390760;PMCID:PMC4932900.
| Cas No. | 7240-90-6 | SDF | |
| Synonyms | BCIG, X-β-Gal, 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside | ||
| Chemical Name | (2S,3R,4S,5R,6R)-2-[(5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl)oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol | ||
| Canonical SMILES | C1=CC(=C(C2=C1NC=C2OC3C(C(C(C(O3)CO)O)O)O)Cl)Br | ||
| Formula | C14H15BrCINO6 | M.Wt | 408.63 |
| Solubility | ≥ 109.4 mg/mL in DMSO, ≥ 3.7 mg/mL in EtOH with ultrasonic and warming | Storage | store at -20°C,protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.4472 mL | 12.236 mL | 24.472 mL |
| 5 mM | 489.4 μL | 2.4472 mL | 4.8944 mL |
| 10 mM | 244.7 μL | 1.2236 mL | 2.4472 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 30 reference(s) in Google Scholar.)
GLPBIO products are for RESEARCH USE ONLY. Please make sure your review or question is research based.
Required fields are marked with *