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Cholera toxin (choleragen) est un complexe protéique entérotoxogène composé d'une seule sous-unité A (sous-unité A de la toxine cholérique, CTA) et d'un pentamère de sous-unités B (sous-unité B de la toxine cholérique, CTB). Il pénètre dans la cellule hôte au moyen de se lier au ganglioside GM1 sur la membrane plasmique et effectue une rétrogradation vers le réticulum endoplasmique via le réseau trans-Golgi[1-3].
Le traitement de Cholera toxin(0.5ug/ml;3h) aux cellules Jurkat pendant 3 heures a entraîné une quasi-disparition totale du complexe TcR de la surface de la cellule[4,5]. Cholera toxin pénètre dans les cellules épithéliales intestinales de l'hôte, et son transport rétrograde vers le cytosol entraîne une perte massive de fluides et d'électrolytes associée à une sévère déshydradation[6]. Cholera toxin active l'adénylate cyclase par catalyser ADP-ribosylation de Gs alpha, la protéine de liaison des nucléotides de guanine stimulante[7].
References:
[1]. van Heyningen S. Cholera toxin. Biol Rev Camb Philos Soc. 1977 Nov;52(4):509. doi: 10.1111/j.1469-185x.1977.tb00858.x. PMID: 203347.
[2]. Wernick NL, Chinnapen DJ, et,al. Cholera toxin: an intracellular journey into the cytosol by way of the endoplasmic reticulum. Toxins (Basel). 2010 Mar;2(3):310-25. doi: 10.3390/toxins2030310. Epub 2010 Mar 5. PMID: 22069586; PMCID: PMC3153193.
[3]. Kellner A, Taylor M, et,al. A binding motif for Hsp90 in the A chains of ADP-ribosylating toxins that move from the endoplasmic reticulum to the cytosol. Cell Microbiol. 2019 Oct;21(10):e13074. doi: 10.1111/cmi.13074. Epub 2019 Jul 5. PMID: 31231933; PMCID: PMC6744307.
[4]. Sommermeyer H, Schwinzer R,et,al. Cholera toxin modulates the T cell antigen receptor/CD3 complex but not the CD2 molecule and inhibits signaling via both receptor structures in the human T cell lymphoma Jurkat. Eur J Immunol. 1989 Dec;19(12):2387-90. doi: 10.1002/eji.1830191232. PMID: 2575034.
[5]. Nunes J, Bagnasco M, et,al. Cholera toxin inhibits the increase in cytoplasmic free calcium induced via the CD2 pathway of human T-lymphocyte activation. J Cell Biochem. 1989 Apr;39(4):391-400. doi: 10.1002/jcb.240390405. PMID: 2542344.
[6]. Wands AM, Cervin J, et,al. Fucosylated Molecules Competitively Interfere with Cholera Toxin Binding to Host Cells. ACS Infect Dis. 2018 May 11;4(5):758-770. doi: 10.1021/acsinfecdis.7b00085. Epub 2018 Feb 22. PMID: 29411974; PMCID: PMC5948155.
[7]. Tsai SC, Noda M, et,al. Stimulation of choleragen enzymatic activities by GTP and two soluble proteins purified from bovine brain. J Biol Chem. 1988 Feb 5;263(4):1768-72. PMID: 3123477.
Protocole (Protocol)
| Expériences cellulaires [1]: | |
Lignées cellulaires | Cellules Jurkat |
Méthode de préparation | Les cellules ont été incubées pendant 3 heures avec du milieu seul ou avec Cholera toxin (0.5 ug/ml) dans le milieu. Après le lavage des cellules, l'expression de l'antigène indiqué à la surface des cellules a été mesurée par analyse en cytométrie de flux (FCM). |
Conditions de réaction | 0.5ug/ml;3h |
Domaines d'application | Le traitement de Cholera toxin aux cellules Jurkat pendant 3 heures a entraîné une disparition presque totale du complexe TcR de la surface de la cellule. |
References: | |
Documents produit (Product Documents)
Propriétés chimiques (Chemical Properties)
Utilisez les solutions mères dans les 6 mois si elles sont conservées à -80°C, ou dans le mois si elles sont conservées à -20°C.
Pour améliorer la solubilité, réchauffez le tube à 37°C et soniquez-le pendant une durée appropriée.
Calculateurs (Calculators)Molarité / Dilution / Masse moléculaire / Conversion d’unités
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