LCMV gp33-41 TFA |
Catalog No.GC39592
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LCMV gp33-41 TFA est un épitope lymphocytaire T cytotoxique (LTC) de 9 acides aminés, issu de la glycoprotéine GP1 du virus de la choriméningite lymphocytaire (VCM). Il permet de déclencher les réponses immunitaires cellulaires antivirales, en activant les lymphocytes T cytotoxiques CD8⁺ spécifiques du virus, grâce à la présentation d'antigène restreinte par la molécule H-2Db.
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Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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LCMV gp33-41 TFA est un épitope lymphocytaire T cytotoxique (LTC) de 9 acides aminés, issu de la glycoprotéine GP1 du virus de la choriméningite lymphocytaire (VCM). Il permet de déclencher les réponses immunitaires cellulaires antivirales, en activant les lymphocytes T cytotoxiques CD8⁺ spécifiques du virus, grâce à la présentation d'antigène restreinte par la molécule H-2Db[1-2]. LCMV gp33-41 TFA peut être utilisé à rechercher la détection des lymphocytes T spécifiques d'un virus, l'étude des mécanismes de mémoire immunologique, et la mise au point de plateformes d'immunothérapie antivirale[3-4].
Les splénocytes des rats transgéniques pour TCR ont été traités in vitro avec LCMV gp33-41 TFA (5µM) pendant 2h, puis on les a stimulés pendant 5 jours avec un milieu contenant d'IL-2. LCMV gp33-41 TFA a bien permis d'induire et de multiplier les lymphocytes T effecteurs CD8⁺ activés, spécifiques de gp33[5]. Des macrophages issus de la moelle osseuse (BMDM) ont été incubés toute la nuit avec LCMV gp33-41 TFA (10ng/µL) et LPS (100ng/mL), puis co-cultivés pendant 3 jours avec des lymphocytes T CD8⁺ spécifiques de cet antigène. LCMV gp33-41 TFA a alors déclenché l'expression du marqueur d'activation CD44 sur ces lymphocytes T[6].
Les cellules dendritiques issues de la moelle osseuse (BMDC) ont été incubées in vivo avec LCMV gp33-41 TFA (1µM) pendant une heure. Après cela, on a transféré par adoption 100 à 1×10⁶ de ces cellules dendritiques aux rats C57BL/6, par injection intraveineuse, sous-cutanée ou directement dans la rate. LCMV gp33-41 TFA a très bien induit une réponse lymphocytaire T cytotoxique (LTC) spécifique du virus, offrant aux rats une protection rapide et durable contre une infection par VCM. Il a aussi permis d'éliminer le virus des tissus périphériques (comme les ovaires et le cerveau), évitant ainsi une chorioméningite mortelle[7]. On a utilisé LCMV gp33-41 TFA (100µg) émulsifié dans de l'ajuvant complet de Freund pour amorcer les rats C57BL/6 par voie sous-cutanée au jour 0, puis réalisé des rappels d'immunisation aux jours 7 et 14 avec la même dose de peptide émulsifié dans de l'ajuvant incomplet de Freund. Chez les rats, LCMV gp33-41 TFA n'a induit qu'une faible fréquence de lymphocytes T CD8 spécifiques. La plupart de ces cellules avaient un phénotype de ces cellules avaient un phénotype de type effecteur (CD127⁻CD62L⁻) exprimant le récepteur inhibiteur PD-1[8].
References:
[1] Smyth M, Khamina K, Popa A, et al. Characterization of CD8 T Cell-Mediated Mutations in the Immunodominant Epitope GP33-41 of Lymphocytic Choriomeningitis Virus. Front Immunol. 2021 Jun 14;12:638485.
[2] Gairin JE, Mazarguil H, Hudrisier D, et al. Optimal lymphocytic choriomeningitis virus sequences restricted by H-2Db major histocompatibility complex class I molecules and presented to cytotoxic T lymphocytes. J Virol. 1995 Apr;69(4):2297-305.
[3] Fridkis-Hareli M, Reinherz EL. New approaches to eliciting protective immunity through T cell repertoire manipulation: the concept of thymic vaccination. Med Immunol. 2004 Dec 8;3(1):2.
[4] Gallimore A, Glithero A, Godkin A, et al. Induction and exhaustion of lymphocytic choriomeningitis virus-specific cytotoxic T lymphocytes visualized using soluble tetrameric major histocompatibility complex class I-peptide complexes. J Exp Med. 1998 May 4;187(9):1383-93.
[5] Laidlaw BJ, Decman V, Ali MA, et al. Cooperativity between CD8+ T cells, non-neutralizing antibodies, and alveolar macrophages is important for heterosubtypic influenza virus immunity. PLoS Pathog. 2013 Mar;9(3):e1003207.
[6] Hering M, Madi A, Sandhoff R, et al. Sphinganine recruits TLR4 adaptors in macrophages and promotes inflammation in murine models of sepsis and melanoma. Nat Commun. 2024 Jul 18;15(1):6067.
[7] Ludewig B, Ehl S, Karrer U, et al. Dendritic cells efficiently induce protective antiviral immunity. J Virol. 1998 May;72(5):3812-8.
[8] Liu Y, Xu L, Jiang Y, et al. Phenotypic and functional analysis of LCMV gp33-41 TFA-specific CD8 T cells elicited by multiple peptide immunization in mice revealed the up-regulation of PD-1 expression on antigen-specific CD8 T cells. Cell Mol Immunol. 2007 Dec;4(6):431-7.
| Expériences cellulaires [1]: | |
Lignées cellulaires | Splénotypes |
Méthode de préparation | On a incubé les splénotypes avec le peptide LCMV gp33-41 TFA à 5µM pendant 2h. Après avoir retiré le peptide, on a cultivé les cellules dans un milieu supplémenté en IL-2 pendant 5 jours pour obtenir les lymphocytes T CD8+ effecteurs. |
Conditions de réaction | 5µM; incubation initiale de 2h, suivi d'une culture de 5 jours |
Domaines d'application | La stimulation par le peptide LCMV gp33-41 TFA a induit l'activation et la prolifération des lymphocytes T CD8+ spécifiques de l'antigène, comme l'ont montré l'augmentation de l'expression des marqueurs d'activation (par exemple, CD44) et l'acquisition de la fonction effectrice. |
| Expériences animales [2]: | |
Modèles animaux | Rats C57BL/6 féminins (âgés de 6 à 8 semaines) |
Méthode de préparation | On a immunisé les rats par injection sous-cutanée dans les pattes arrières, au jour 0, de 100µg de LCMV gp33-41 TFA émulsifié dans l'adjuvant complet de Freund (ACF). Puis, on a réalisé les rappels d'immunisation aux jours 7 et 14, avec 100µg du même peptide LCMV gp33-41 TFA émulsifié dans l'adjuvant incomplet de Freund (AIF). |
Forme de dosage | 100μg; s.c.; amorçage au jour 0 et rappels aux jours 7 et 14. |
Domaines d'application | Cet amorçage suivi de rappels avec LCMV gp33-41 TFA a induit une faible fréquence de lymphocytes T CD8 spécifiques de LCMV gp33-41 TFA chez les rats. Ces lymphocytes T induits présentaient majoritairement un phénotype de type effecteur (CD127⁻CD62L⁻), exprimant le récepteur inhibiteur PD-1 (en particulier dans la rate et les ganglions lymphatiques). |
References: | |
| Cas No. | SDF | ||
| Formula | C50H74N11F3015S | M.Wt | 1158.24 |
| Solubility | DMSO : 100 mg/mL (86.34 mM; Need ultrasonic) | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 863.4 μL | 4.3169 mL | 8.6338 mL |
| 5 mM | 172.7 μL | 863.4 μL | 1.7268 mL |
| 10 mM | 86.3 μL | 431.7 μL | 863.4 μL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >99.00% Appearance: A solid
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- SDS (Safety Data Sheet)
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