製品は研究用途にのみ使用できます。人体には使用できません。患者への販売は行っておりません。
| Pack Size | Price | Availability | Quantity | Action |
|---|---|---|---|---|
| 10mM (in 1mL DMSO) | $79.00 | In Stock | 1 | |
| 5mg | $72.00 | In Stock | 1 | |
| 10mg | $117.00 | In Stock | 1 | |
| 25mg | $234.00 | In Stock | 1 | |
| 50mg | $378.00 | In Stock | 1 | |
| 100mg | $612.00 | In Stock | 1 |
CellTracker Blue CMACは、明るい青色の蛍光を放つ生細胞追跡プローブ（Ex/Em: 353/466nm）である[1]。CellTracker Blue CMACは自由に細胞膜を透過し、細胞に入り、細胞膜を透過不能な反応製品に変換することができる。細胞の運動、局在化、増殖、遊走、走化性、浸潤の監視に使われることは可能である。
References:
[1] Lee DY, Lim KS, Valencia GM, et al. One-Step Method for Instant Generation of Advanced Allogeneic NK Cells. Advanced Science. 2018 Nov;5(11):1800447.
このプロトコールはあくまでもガイドラインであり、お客様にはご自分のニーズに合わせてご調整願います。
1.染色溶液の調製
（1）貯蔵液の調製：CellTracker Blue CMAC粉末をDMSOに溶解し、濃度が1-25mMの貯蔵液を調製する。
注：未使用の貯蔵液は小分けし、-20℃または-80℃の暗闇で保存し、よって繰り返した冷凍と解凍の循環を避ける。
（2）作業溶液の調製：適切な緩衝液（例えば無血清培地またはPBS）で貯蔵液を希釈し、濃度が0.5-25μMの作業溶液を調製する。
注：実際の条件に合わせて作業溶液の濃度を調整し、需要に応じて調製してください。
2.細胞懸濁染色
（1）懸濁細胞：4℃、1000gで3-5分間遠心分離し、上清を廃棄し、PBSで二回洗浄する。
（2）接着細胞：PBSで二回洗浄し、トリプシンを添加して細胞を消化し、その後は1000gで3-5分間遠心分離する。
（3）1mLのCellTracker Blue CMAC作業溶液を添加し、細胞を再懸濁し、37℃で暗闇で15-45分間培養する。異なる細胞の最適培養時間は異なる可能性があるので、特定の実験需要に応じてご調整願います。
（4）培養後、1000gで5分間遠心分離し、上清を除去し、PBSで1回に5分間、2-3回洗浄する。
（5）細胞を事前加熱した無血清細胞培地またはPBSで再懸濁する。
3.細胞接着染色
（1）接着細胞を無菌のカバーガラスに培養する。
（2）カバーガラスを培地から除去し、過剰の培地を拭き取り、カバーガラスを湿った環境に置く。
（3）100μLの染料作業溶液をカバーガラスの一角から添加し、ゆっくり振動させ、全ての細胞が染料にカバーされるのを確保する。
（4）37℃で、暗闇で15-45分間培養する。異なる細胞の最適培養時間は異なるので、特異的な実験需要に応じてご調整願います。
（5）培養後、染料作業溶液を吸い出し、事前加熱した培地でカバーガラスを2-3回洗浄する。
4.顕微鏡検出：CellTracker Blue CMACの最大励起/発光波長は353/466nmである。
注意事項：
①蛍光色素は消光するので、できる限り光への暴露を避けて、蛍光の消光を遅延させる。
②安全と健康のためには、実験中に白衣と使い捨ての手袋をご装着ください。
