Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus |
カタログ番号GC19846
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Lysing Enzymes from Arthrobacter luteusはArthrobacter luteus由来の溶解酵素で、中国語では細胞溶解酵素または溶解酵素とも呼ばれ、poly-β(1→3)-glucose (pol-β(1→3)-glucose)を特異的に分解し、酵母細胞壁の完全性を破壊することができる高性能の加水分解酵素である
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 37340-57-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Lysing Enzymes from Arthrobacter luteusはArthrobacter luteus由来の溶解酵素で、中国語では細胞溶解酵素または溶解酵素とも呼ばれ、poly-β(1→3)-glucose (pol-β(1→3)-glucose)を特異的に分解し、酵母細胞壁の完全性を破壊することができる高性能の加水分解酵素である。
Arthrobacter luteus由来のLysing Enzymeは、酵母細胞壁の腫瘍の主要な構成成分の一つであるpoly-β(1→3)-glucose鎖を特異的に切断する。酵母細胞壁は主にグルカン、キチン、マンノプロテインから構成されており、中でもpoly-β(1→3)-glucoseは細胞壁の主要な骨格成分である。酵母細胞壁は、その複雑な多層構造と、カプセルや抵抗性胞子の形成の可能性から通常の物理的・化学的方法では破壊が困難である。Arthrobacter luteus由来のLysing Enzymeは細胞壁の主要成分を標的とする加水分解することで、細胞壁の機械的強度を著しく低下させ、その後部分的なプロトプラストの形成を誘導し、細胞溶解とDNA放出のための効率的で穏やかなソリューションを提供する。実用的なアプリケーションにおいて、Arthrobacter luteus由来のLysing EnzymeはSaccharomyces cerevisiaeとSchizosaccharomyces pombeを含む様々な酵母や真菌の細胞壁を溶解するために使用することができる。Arthrobacter luteus由来のLysing Enzymeは効率的な加水分解、広範な適応性、高い安定性という利点を持つ。
References:
[1] KITAMURA K, KANEKO T, YAMAMOTO Y. Lysis of viable yeast cells by enzymes of Arthrobacter luteus II. Purification and properties of an enzyme, zymolyase, which lyses viable yeast cells[J]. The Journal of General and Applied Microbiology, 1974, 20(6): 323-344.
[2] Połomska X, Kierul M, Dąbrowska A, et al. The effectiveness comparison of linear dsDNA plasmids isolation from Debaryomyces hansenii yeasts depending on cell disintegration technique[J]. Acta Scientiarum Polonorum. Biotechnology, 2014.
このプロトコールはガイダンスであるため、各自のニーズに応じて調整してください。
F. oxysporum 病原体の原形質の調製：
1、酵素液の調製：500mgのドリセラーゼ、200mgのArthrobacter luteus由来のLysing Enzyme、200mgのスネイラーゼを20mLの1.2M KCl溶液に溶解し、酵素消化液を調整する。1mLの1M Tris-HCl（pH7.5）、2mLの2.5M CaCl2、96mLのddH2Oを混合し、sucrose-tris-calcium (STC)バッファーを調整し、冷蔵庫で4℃で保存する。
2、細胞処理：F. oxysporumをペプトンデキストロース酵母(YPD)液体培地で培養し、胞子を回収した後、アンピシリンを含むYPD培地に接種して一晩培養する。その後、菌糸体を滅菌蒸留水と1.2M KClで順次に洗浄し、培養液やその他の不純物を除去し、その後の酵素消化に備えた。
3、インキュベーション反応：洗浄された菌糸体を、調製した酵素溶液とともに28℃、振とう速度90rpmで4時間インキュベートし、酵素の消化作用によって菌糸体壁を破壊し、プロトプラストを放出させた。インキュベーション後、プロトプラストを濾過して分離し、5000rpmで4℃で90秒間遠心分離し、STCバッファーで3回洗浄して残留酵素やその他の不純物を除去した。
注意：
（1）安全と健康のため、使用時には白衣と保護手袋を着用してください。
（2）Arthrobacter luteus由来のLysing Enzymeの活性は、イオン濃度、反応温度、pHなどに影響される。初めて使用する場合は、最適な濃度を見つけることをお勧めします。
References:
[1] Fan S, Zhou Y, Zhu N, et al. Exogenous Application of dsRNA—Inducing Silencing of the Fusarium oxysporum Tup1 Gene and Reducing Its Virulence[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2024, 25(19): 10286.
| Cas No. | 37340-57-1 | SDF | |
| Formula | M.Wt | ||
| 溶解度 | Storage | Store at 2-8°C | |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Biological Activity: 298u/mg Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 10 reference(s) in Google Scholar.)