DiBAC4(3)

DiBAC4(3) est un colorant bis-oxonol à charge négative sensible au potentiel de membrane, avec un maximum d'excitation à environ 490nm et son émission de fluorescence est collecté à l'aide d'un filtre de 520nm^[1]. DiBAC4(3) est un outil polyvalent pour le suivi du potentiel de membrane, les essais de viabilité et les essais de sensibilité aux antibiotiques.

In vitro, DiBAC4(3) a été utilisé pour mesurer les potentiels de membrane dans les cellules HEK293 exprimant les canaux K⁺ Ca²⁺-activés à grande conductance (canaux BK) recombiants (HEKBKα et HEKBKβ ). Les cellules ont été incubées dans un tampon KRH (Krebs-RingerHEPES) contenant 100nM DiBAC4(3) pendant 20min à la température ambiante. L'hyperpolarisation oscillatoire de la membrane induite dans HEKBKαβ par DiBAC4(3)^[2] a été détectée que sous forme d'hyperpolarisation lente. Les cellules de B. subtilis incubées avec des antimocrobiens ciblant la membrane ont été colorées avec 10μM DiBAC4(3) pendant 17h et ont été observées au microscope à contraste de phase et à fluorescence pour évaluer les effets des composés antimicrobiens sur l'intégrité et la fonction de la membrane^[3]. DiBAC4(3) (1μM) a été utilisé pour évaluer la viabilité cellulaire et le potentiel de membrane dans les cultures affamées d' E. coli et de Salmonella en eau de mer. Les cellules peuvent maintenir un certain potentiel de membrane sans nécessairement présenter une respiration active, surtout dans les conditions d'affamement^[4].

References:
[1] Epps D E, Wolfe M L, Groppi V. Characterization of the steady-state and dynamic fluorescence properties of the potential-sensitive dye bis-(1,3-dibutylbarbituric acid)trimethine oxonol (Dibac4(3)) in model systems and cells. Chem Phys Lipids. 1994 Feb;69(2):137-50.
[2] Yamada A, Gaja N, Ohya S,et al. Usefulness and limitation of DiBAC4(3), a voltage-sensitive fluorescent dye, for the measurement of membrane potentials regulated by recombinant large conductance Ca₂₊-activated K+ channels in HEK293 cells. Jpn J Pharmacol. 2001 Jul;86(3):342-50.
[3] Winkel J D T, Gray D A, Seistrup K H. Analysis of Antimicrobial-Triggered Membrane Depolarization Using Voltage Sensitive Dyes. Front Cell Dev Biol. 2016 Apr 13:4:29.
[4] Amorós R L, Castel S, Riu J C, Rego J V. Assessment of E. coli and Salmonella viability and starvation by confocal laser microscopy and flow cytometry using rhodamine 123, DiBAC4(3), propidium iodide, and CTC. Cytometry. 1997 Dec 1;29(4):298-305.