Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus |
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Catalog No.GC19846
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Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus, également connue sous le nom d'enzymes de lyse de la paroi celllaire ou d'enzymes de lyse en chinois, ceux sont les hydrolases efficaces hautement qui peuvent dégrader de façon spécifique poly-β(1→3)-glucose (poly-β(1→3)-glucose) et détruire l'intégrité des parois cellulaires de levure.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 37340-57-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus, également connue sous le nom d'enzymes de lyse de la paroi celllaire ou d'enzymes de lyse en chinois, ceux sont les hydrolases efficaces hautement qui peuvent dégrader de façon spécifique poly-β(1→3)-glucose (poly-β(1→3)-glucose) et détruire l'intégrité des parois cellulaires de levure.
Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus coupent de manière spécifique les chaînes de poly-β(1→3)-glucose, ceux qui sont l'un des composants principaux structurels des parois cellulaires de levure. Les parois cellulaires de levure sont principalement composées de glucane, de chitine et de mannoprotéine, parmi lesquels poly-β(1→3)-glucose est le composant squelette principal de la paroi cellulaire. Les parois cellulaires de levure sont généralement difficiles à détruire par les méthodes physiques ou chimiques conventionnelles en raison de leur structure multicouche et de la formation possible de capsules ou de spores résistantes. Les enzymes de lyse d'Arthrobacter luteus réduisent significativement la force mécanique de la paroi cellulaire par l'hydrolyse ciblée des composants clés de la paroi cellulaire, ainsi donc, induire la formation de protopalstes partiels, offrir une solution efficace et douce pour la lyse cellulaire subséquente et la libération d'ADN. Dans les applications pratiques, les enzymes de lyse d'Arthrobacter luteus peuvent être utilisées pour lyser les parois cellulaires d'une variété de levures et de champignons, celles qui comprennent Saccharomyces cerevisiae and Schizosaccharomyces pombe. Les enzymes de lyse d'Arthrobacter luteus possède les avantages d'une hydrolyse efficace, d'une adaptabilité large - spectre et d'une stabilité haute[1] [2].
References:
[1] KITAMURA K, KANEKO T, YAMAMOTO Y. Lysis of viable yeast cells by enzymes of Arthrobacter luteus II. Purification and properties of an enzyme, zymolyase, which lyses viable yeast cells[J]. The Journal of General and Applied Microbiology, 1974, 20(6): 323-344.
[2] Połomska X, Kierul M, Dąbrowska A, et al. The effectiveness comparison of linear dsDNA plasmids isolation from Debaryomyces hansenii yeasts depending on cell disintegration technique[J]. Acta Scientiarum Polonorum. Biotechnology, 2014.
Ce protocole fournit seulement un guide. L'application réelle doit être modifiée en fonction de vos besoins.
Préparation de protoplastes pathogènes de F. oxysporum[1]:
1.Préparation de la solution enzymatique : Dissoudre 500mg Driselase, 200mg enzymes de lyse d'Arthrobacter luteus et 200mg Snailase dans 20mL solution de 1,2M KCI pour préparer la solution d'hydrolyse enzymatique. Mélanger 1mL Tris-HCl (pH 7.5), 2mL 2.5M CaCl2, et 96mL ddH2O pour préparer le tampon sucrose - tris - calcium (STC) et le stocker dans le réfrigérateur à 4°C.
2. Traitement cellulaire : Après que F. oxysporum est cultivé dans un substrat liquide peptone - déxtrose (YPD) et que les spores sont collectées, elles sont inocubées dans un substrat YPD qui contient l'ampicilline pour une culture pendant la nuit. Puis, le mycélium est lavé de manière successive par l'eau distillée stérile et 1.2M KCl pour éliminer le substrat d'autres impuretés en prévison de l'hydrolyse enzymatique ultérieure.
3. Réaction d'incubation : Le mycélium lavé est incubé avec la solution enzymatique préparée pendant 4h à 28°C et à une vitesse de agitation de 90 rpm pour briser la paroi du mycélium et libérer les protoplastes sont séparés par la filtration et la centrifugation à 500 rpm pendant 90s à 4°C, et sont lavés trois fois par un tampon STC pour éliminer les enzymes résiduelles et l'autres impuretés.
Note :
1.Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter un tablir de laboratoire et les gants de protection lors de l'utilisation.
2.L'activité de Lysing Enzymes from Arthrobacter luteus est affectée par les facteurs comme la concentration d'ion, la température de réaction et pH. C'est recommandé de trouver la concentration optimale lors de la première utilisation.
References:
[1] Fan S, Zhou Y, Zhu N, et al. Exogenous Application of dsRNA—Inducing Silencing of the Fusarium oxysporum Tup1 Gene and Reducing Its Virulence[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2024, 25(19): 10286.
| Cas No. | 37340-57-1 | SDF | |
| Formula | M.Wt | ||
| Solubility | Storage | Store at 2-8°C | |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Biological Activity: 298u/mg Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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