Methoxy-X04

Ce plan ne constitue qu’un guide. Veuillez le modifier en fonction de vos besoins spécifiques.

1. Préparation de la solution de coloration

Solvant : 10 % DMSO, 45 % propylène glycol et 45 % solution tampon phosphate (PBS) (pH 7,5, 0,01 M, 5 mg/ml)

(1) Utiliser une microbalance pour peser 5 mg de Methoxy-X04, dissoudre le Methoxy-X04 dans le DMSO sous une hotte chimique et remuer jusqu’à obtention d’une solution verte claire ;

(2) Ajouter successivement le propylène glycol et la solution tampon phosphate, en remuant à chaque ajout ;

(3) Placer la solution sur un agitateur rotatif et la mélanger à 4 °C jusqu’à ce qu’elle devienne une émulsion jaune-vert ;

2. Injection animale : Les animaux expérimentaux sont des souris à titre d’exemple. Le Methoxy-X04 est administré par injection intrapéritonéale à une dose de 10 mg/kg.

3. Réalisation de coupes tissulaires congelées, épaisseur d’échantillon recommandée : 40-50 µm ;

4. Observer les coupes au microscope à fluorescence pour identifier les zones contenant des plaques Aβ marquées par le Methoxy-X04. REMARQUE : Le Methoxy-X04 peut être facilement observé à l’aide d’un filtre fluorescent ultraviolet (UV) (longueur d’onde d’excitation 340 - 380 nm).

Précautions :

1) Les colorants fluorescents présentent tous des problèmes d’extinction. Veuillez éviter la lumière autant que possible pour ralentir l’extinction de la fluorescence.

2) Pour votre sécurité et votre santé, portez une blouse de laboratoire et des gants jetables.

Références :

[1]. Kanchan Bisht, et al. Correlative Light and Electron Microscopy to Study Microglial Interactions with β-Amyloid Plaques. 2016 Jun 1:(112):54060. doi: 10.3791/54060.

[2]. Marcin Sadowski, et al. Targeting prion amyloid deposits in vivo. 2004 Jul;63(7):775-84. doi: 10.1093/jnen/63.7.775.