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N4-Methyl-dCTP

Catalog No.: GB20062Purity:>98.50%
COASDSData Sheet
Le N4-Methyl-dCTP (N4me-dCTP) est un analogue du désoxycytidine 5'-triphosphate (dCTP) utilisé dans la synthèse de l’AND ou de l’ARN avec la PCR.

Les produits sont exclusivement destinés à la recherche. Ils ne doivent pas être utilisés chez l’être humain. Nous ne vendons pas aux patients.

N4-Methyl-dCTP
Cas No.: 149674-24-8
10ul (100mM)In Stock
$93.00
1
50ul (100mM)In Stock
$436.00
1
100ul (100mM)In Stock
$748.00
1
Tel: (909) 407-4943 / (909) 689-7124Email: sales@glpbio.com

Citations

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  • Nature cover
    Nature
    641, 529–536 (2025)
  • Nature cover
    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
  • Cell cover
    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
  • Science cover
    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

Description

Le N4-Methyl-dCTP (N4me-dCTP) est un analogue du désoxycytidine 5'-triphosphate (dCTP) utilisé dans la synthèse de l’AND ou de l’ARN avec la PCR[1]. Le N4-Methyl-dCTP (200µM) améliore la sortie de la synthèse de l’AND dans les régions riches en GC[1], et il est mieux accepté par la polymérase lors de la détection de SNP[3] en surmontant les structures secondaires fortes qui interfèrent avec l’annelage des amorces[4].

References:
[1] Flores-Juárez, Cyntia R et al. “PCR amplification of GC-rich DNA regions using the nucleotide analog N4-methyl-2'-deoxycytidine 5'-triphosphate.” *BioTechniques* vol. 61,4 175-182. 1 Oct. 2016, doi:10.2144/000114457
[2] Ehrlich, M et al. “DNA methylation in thermophilic bacteria: N4-methylcytosine, 5-methylcytosine, and N6-methyladenine.” *Nucleic acids research* vol. 13,4 (1985): 1399-412. doi:10.1093/nar/13.4.1399
[3] Yang, Zunyi et al. “Eliminating primer dimers and improving SNP detection using self-avoiding molecular recognition systems.” *Biology methods & protocols* vol. 5,1 bpaa004. 10 Feb. 2020, doi:10.1093/biomethods/bpaa004
[4]Swenson, Stephanie J, and Birgit Gemeinholzer. “Testing the effect of pollen exine rupture on metabarcoding with Illumina sequencing.” *PloS one* vol. 16,2 e0245611. 2 Feb. 2021, doi:10.1371/journal.pone.0245611

Protocole (Protocol)

Amplification PCR des régions de l’AND riches en GC utilisant l’analogue de nucléotide N4-Methyl-dCTP [1]

1. Conception des amorces :

Utiliser le programme PrimerQuest de la technologie d’AND intégrée pour la conception des amorces. Sélectionner les amorces contenant le moins possible de guanines dans leur séquence afin de minimiser la réduction de la température d’hybridation des amorces pour le modèle d’ADN contenant N4meC.

2. Procédure PCR :

2.1 Préparer le mélange PCR : 30ng d’DNA génomique humain ; 0.5µM de chaque amorce ; tampon PCR (50µM KCl ; 10µM Tris-HCl ; pH=8.3) ; 200µM de chaque désoxyribonucléotide (dATP, dGTP, dTTP, et dCTP) ou 200µM de N4me-dCTP à la place de dCTP dans le cas des amplicons modifiés ; 1.5U de Taq AND polymérase ; 2.5µM de MgCl2 ; et SYBR Green I à une concentration final de 0.4×.

2.2 Protocole de cyclage : 95°C pendant 1min ; suivi de 45 cycles de 95°C pendant 30s ; 62°C, 64°C, ou 66°C pendant 30s ; et 72°C pendant 60s; avec une extension finale à 72°C pendant 4min.

Ce protocole n’a qu’une ligne directrice et doit être modifié en fonction de vos besoins spécifiques

[1]Flores-Juárez, Cyntia R et al. “PCR amplification of GC-rich DNA regions using the nucleotide analog N4-methyl-2'-deoxycytidine 5'-triphosphate.” BioTechniques vol. 61,4 175-182. 1 Oct. 2016, doi:10.2144/000114457

Documents produit (Product Documents)

Purity:>98.50%Appearance:A solution
COASDSData Sheet

Propriétés chimiques (Chemical Properties)

N° CAS
149674-24-8
Formule moléculaire
C10H18N3O13P3 (free acid)
Masse moléculaire
481.1 (free acid)
Conservation
Store at -20°C or below
Conseils généraux
Choisissez un solvant adapté selon les données de solubilité du produit. Après préparation, répartissez la solution mère en aliquotes afin d’éviter les cycles répétés de congélation-décongélation.
Utilisez les solutions mères dans les 6 mois si elles sont conservées à -80°C, ou dans le mois si elles sont conservées à -20°C.
Pour améliorer la solubilité, réchauffez le tube à 37°C et soniquez-le pendant une durée appropriée.
Conditions d’expédition
Les échantillons d’évaluation sont expédiés avec des blocs réfrigérants. Les autres formats sont expédiés à température ambiante ou, sur demande, avec des blocs réfrigérants.

Reviews

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