Recombinant Human Fibronectin ,rFN

Ce protocole utilise un exemple d'expérience de revêtement de culture cellulaire et est fourni à titre indicatif seulement. Les conditions réelles d'application peuvent nécessiter une optimisation en fonction des besoins expérimentaux spécifiques^[1].

1, Préparation de la solution

A récpetion, dissoudre Recombinant Human Fibronectin ,rFN dans PBS 1× stérile pour obtenir une solution mère à une concentration de 1mg/mL. Aliquotter la solution mère en volumes à usage unique et conserver à –20°C pour éviter les cycles répétés de congélation-décongélation. Avant utilisation, décongeler l'aliquot nécessaire et le diluer avec PBS 1× stérile (pH 7.2-7.4) pour préparer la solution de travail. La concentration de travail recommandée est de 50 à 100μg/mL.

2. Revêtement des plaques (exemple: plaque 6 puits)

Ajouter environ 800μL de la solution de travail de Recombinant Human Fibronectin ,rFN dans chaque puit d'une plaque 6 puits, en veillant à couvrir uniformément toute la surface inférieure. Incuber la plaque dans l'une des conditions suivantes: overnight à 4°C ou 1 heure à 37°C.

3. Récupération de la solution de travail

Après incubation, récupérer la solution de travail restante et la conserver à –20℃. El peut être réutilisée pour revêtir d'autres récipients de culture dans un délai d'une semaine, à condition que la stérilité soit maintenue.

4. Ensemencement des cellules

Après revêtement, retirer l'excès de solution si nécessaire. Ajouter le volume approprié de milieu de culture cellulaire complet et procéder directement à l'ensemencement des cellules. Recombinant Human Fibronectin ,rFN améliore l'adhésion cellulaire, favorise l'étalement et la migration des cellules, et soutient une croissance cellulaire optimale.

Remarques importantes

1, Si la solution de travail de Recombinant Human Fibronectin ,rFN n'est pas utilisée immédiatement, elle peut être conservée dans un récipient scellé à –20℃. Il est recommandé de l'utiliser dans un délai d'une semaine pour garantir des performances optimales.

2. Ajouter le volume de la solution de travail en fonction de la taille et de la surface de la plaque ou flacon de culture utilisé.

3. En tant que protéine recombinante, Recombinant Human Fibronectin ,rFN doit être manipulée avec précaution. Eviter une agitation vigoureuse lors de la dissolution et ne pas la soumettre à des cycles répétés de congélation-décongélation.

4. Pour des raisons de sécurité en laboratoire, porter des équipements de protection individuelle appropriés (blouse de laboratoire, gants jetables) lors de la manipulation.

References:
[1]. Rappa G, Kunke D, Holter J, et al. Efficient expansion and gene transduction of mouse neural stem/progenitor cells on recombinant fibronectin[J]. Neuroscience, 2004, 124(4): 823-830.