BMPO

BMPOによるヒドロキシルラジカルの評価

このプロトコールはガイドラインのみを提供し、ご自分の具体的なニーズに合わせてご調整願います。

1.原液と作業溶液の調製

（1）DMSOにBMPO粉末を溶解することでBMPO原液（100mM）を調製し、その後適切な体積に分注し、-20℃で保存する。

（2）リン酸緩衝液を使い、BMPO原液を最終濃度が30mMの作業溶液に希釈する。

注：作業溶液は実験の当日に新鮮に調製しなければならない。

2.BMPO付加体の電子常磁性共鳴（EPR）研究

（1）リン酸緩衝液に希釈されたBMPO（30mMの最終濃度；37°C）に、飽和KO₂/DMSO溶液（10% v/v DMSO/最終緩衝液）を添加することでBMPO-OOHを調製した。

（2）BMPO/KO₂のサンプルを10秒間混ぜて、その後、研究された化合物（H₂S_n, SeOn²⁻またはH₂S_n/SeO_n²⁻混合物）を添加した。サンプルをもう一度、5秒間混ぜて、標準キャビティ水性EPRフラットに移した。化合物添加の100秒後に、最初のEPRスペクトルを測定した。BMPOスピン付加体の個別のEPRスペクトルのセットを、計11分間の測定時間で、42秒間の15回の連続スキャンで記録した。各実験を少なくとも2回繰り返した。

3.実験の注意事項

（1）このプロトコールと全ての試薬は、科学研究のみに使える。

（2）ご自分の安全と健康の為に、操作時は白衣と使い捨ての手袋をご装着願います。