Dihydroethidium (Hydroethidine)

Dihydroethidium (Hydroethidine)（DHE）の酸化は、「活性酸素種（ROS）」の細胞産生をモニターする方法として一般的に用いられている。通常、細胞や組織の酸化によるDHEの蛍光の変化は、顕微鏡やフローサイトメトリー、時にはHPLC分析によって測定される。Dihydroethidiumは疎水性の非荷電性化合物で、細胞外膜や細胞内膜を通過することができ、酸化されると正に荷電し、主にDNAリン酸基との静電的相互作用によって、さらに疎水性相互作用を介してDNAにインターカレートすることで細胞内に蓄積する。様々な酸化システムによるその酸化は、細胞や組織における活性酸素産生の蛍光分析にますます使用されるようになっている。ローダミンフィルターで観察されるDihydroethidium由来の赤色蛍光（励起490、発光590 nm）は、2電子酸化産物であるエチジウム化合物の形成に起因し、赤色蛍光は、過酸化水素、ペルオキシナイトライト、ヒドロキシラジカル（フェントン反応により生成）などの酸化剤ではなく、スーパーオキシド生成系（キサンチンオキシダーゼやグルコースオキシダーゼ）により特異的に得られた。

肝組織における活性酸素産生の検出

肝組織における活性酸素産生レベルは、Dihydroethidium（DHE）染色により測定した。各群の肝組織の凍結切片（厚さ5μm）を作製し、DHE（7.5mM）と共に37℃の暗所で30分間インキュベートした。DAPIで染色後、切片を蛍光顕微鏡で観察した。

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