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Cholera toxin (choleragen)은 단일 A 서브유닛 (Cholera toxin A 서브유닛 (CTA))과 B 서브유닛의 펜타머 (Cholera toxin B 서브유닛 (CTB))로 구성된 장 독소 단백질 복합물이다. 이는 플라즈마막의 간기오사이드 GM1에 결합하여 호스트 세포에 들어가고 트랜즈-골지 네트워크를 통해 역성으로 엔도플라즈마 렙트리엄으로 이동한다[1-3].
Cholera toxin (0.5 ug/ml; 3시간)가 3시간 동안 주르카트 세포에 처리되었고 TcR 복합물이 거의 완전히 세포 표면에서 사라졌다[4,5]. Cholera toxin는 호스트 장도 상피 세포에 들어가고 그 후천적 운반으로 인해 세포질로의 대량 유실이 발생하고 심각한탈수와 관련된 대량의 유체와 전해질 유실을 초래한다[6]. Cholera toxin는 Gs alpha의 ADP-ribosylation을 촉매하여 아데닐산 사이클레이즈를 활성화시키고 Gs alpha는 자극성 기아신산 핵산 결합 단백질이다[7].
References:
[1]. van Heyningen S. Cholera toxin. Biol Rev Camb Philos Soc. 1977 Nov;52(4):509. doi: 10.1111/j.1469-185x.1977.tb00858.x. PMID: 203347.
[2]. Wernick NL, Chinnapen DJ, et,al. Cholera toxin: an intracellular journey into the cytosol by way of the endoplasmic reticulum. Toxins (Basel). 2010 Mar;2(3):310-25. doi: 10.3390/toxins2030310. Epub 2010 Mar 5. PMID: 22069586; PMCID: PMC3153193.
[3]. Kellner A, Taylor M, et,al. A binding motif for Hsp90 in the A chains of ADP-ribosylating toxins that move from the endoplasmic reticulum to the cytosol. Cell Microbiol. 2019 Oct;21(10):e13074. doi: 10.1111/cmi.13074. Epub 2019 Jul 5. PMID: 31231933; PMCID: PMC6744307.
[4]. Sommermeyer H, Schwinzer R,et,al. Cholera toxin modulates the T cell antigen receptor/CD3 complex but not the CD2 molecule and inhibits signaling via both receptor structures in the human T cell lymphoma Jurkat. Eur J Immunol. 1989 Dec;19(12):2387-90. doi: 10.1002/eji.1830191232. PMID: 2575034.
[5]. Nunes J, Bagnasco M, et,al. Cholera toxin inhibits the increase in cytoplasmic free calcium induced via the CD2 pathway of human T-lymphocyte activation. J Cell Biochem. 1989 Apr;39(4):391-400. doi: 10.1002/jcb.240390405. PMID: 2542344.
[6]. Wands AM, Cervin J, et,al. Fucosylated Molecules Competitively Interfere with Cholera Toxin Binding to Host Cells. ACS Infect Dis. 2018 May 11;4(5):758-770. doi: 10.1021/acsinfecdis.7b00085. Epub 2018 Feb 22. PMID: 29411974; PMCID: PMC5948155.
[7]. Tsai SC, Noda M, et,al. Stimulation of choleragen enzymatic activities by GTP and two soluble proteins purified from bovine brain. J Biol Chem. 1988 Feb 5;263(4):1768-72. PMID: 3123477.
실험 프로토콜 (Protocol)
| 세포 실험 [1]: | |
세포 라인 | Jurkat 세포 |
제조 방법 | 세포는 배양액에만 있거나 배양액에 Cholera toxin (0.5 ug/ml)를 추가하여 3시간 동안 배양했습니다. 세포를 세척한 후FCM 분석을 통해 세포 표면의 지정된 항원의 표현이 측정되었습니다. |
반응 조건 | 0.5ug/ml;3시간 동안 |
응용 분야 | Cholera toxin가 3시간 동안 Jurkat세포에 처리되었고 TcR 복합물이 거의 완전히 세포 표면에서 사라졌습니다. |
참고문헌: [1]. Nunes J, Bagnasco M, et,al. Cholera toxin inhibits the increase in cytoplasmic free calcium induced via the CD2 pathway of human T-lymphocyte activation. J Cell Biochem. 1989 Apr;39(4):391-400. doi: 10.1002/jcb.240390405. PMID: 2542344. | |
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화학적 특성 (Chemical Properties)
저장 용액은 -80°C 보관 시 6개월 이내, -20°C 보관 시 1개월 이내에 사용하십시오.
용해도를 높이려면 튜브를 37°C로 데운 뒤 적절한 시간 동안 초음파 처리하십시오.
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