Hematoporphyrin (Hematoporphyrin IX)

세포 라인

제조 방법

96웰 판에 웰당 5×10³개의 세포를 심었습니다. 37°C에서 12시간 동안 배양한 후 세포는 인산염 버퍼 생리식염수(PBS, 대조 그룹) 또는 다양한 농도의 Hematoporphyrin(0 - 120nM)으로 60분간 처리되었습니다. M8 스펙트럼에서 전원 에너지 미터를 사용하고 625nm, 5mW/cm²에서 60분간 광선 조사와 37°C에서 22시간 동안 배양한 후, 각 웰에 100µl의 MTT 용액(5.0mg/ml)을 추가하고 37°C에서 4시간 동안 배양했습니다. 이 후에 배양액을 제거하고 생성된 폼아잔 결정을 녹이기 위해 디메틸술폰(웰당 100µl)를 추가했습니다. 흡광도 값을 520nm 파장에서 마이크로플레이트 리더로 측정했습니다. 상대 세포 생존력은 대조 그룹에 대한 정규화를 통해 계산되었습니다. 실험은 독립적으로 세 번 수행되었다.

반응 조건

응용 분야

동물 모형

제조 방법

Hematoporphyrin은 150 mmol/L 버퍼 생리식염수에 녹이고 1 mg/ml Hematoporphyrin 용액을 준비했습니다.

체중이 15~18g인 BALB/c 누드 쥐 30마리를 정상 대조 그룹(10마리), 모델 그룹(10마리) 및 Hematoporphyrin 처치 모델 그룹(10마리)으로 나누었습니다.

인간 위암 세포 라인 MCG-803 세포는 10% 태아 소 혈청, 50U/ml 페니실린 및 50µg/ml마이신이 보충된 DMEM 배양액에서 배양되었습니다. MCG-803 종양 세포 소생된 용액(쥐당 5 - 10×10⁶ 생존 세포)을 BALB/c 누드 쥐의 우측 등부에 주입했습니다. 20일 후 주입된 종양의 직경은 약 0.8 - 1.0mm에 도달했고 쥐는 안락사되었고 종양이 절제되어 현장 위암 동물 모델을 구축하기 위해 사용되었습니다. 절제된 종양 조직은 약 1mm³ 크기의 작은 종양 조직으로 잘랐습니다. 모델 그룹의 20마리 쥐의 복강은 수술을 통해 열리고 위벽이 노출되었고 작은 종양 조직은 위벽에 이식되었습니다. 20일 후 이식된 종양의 직경이 약 0.4 - 0.6mm가 될 때 동물들은 광학 일치성 단층 촬영(OCT) 영상을 위해 준비되었습니다.

제형

응용 분야

Hematoporphyrin은 종양 조직에서 OCT신호를 현저하게 감소시켰고 정상 조직과 종양 조직의 OCT 영상 대비를 향상시켰습니다.

References:
[1] Yuan SX, Li JL, Xu XK, et al. Underlying mechanism of the photodynamic activity of hematoporphyrin?induced apoptosis in U87 glioma cells. Int J Mol Med. 2018;41(4):2288-2296.
[2] Xiong H, Zeng C, Guo Z, et al. Potential ability of hematoporphyrin to enhance an optical coherence tomographic image of gastric cancer in vivo in mice. Phys Med Biol. 2008;53(23):6767-6775.