CleanCap Reagent AU |
Catalog No.GN20150
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CleanCap Reagent AU tiene una finalidad muy definida. Se fabricó para el recubrimiento capilar durante la transcripción, con estructura m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU, logrando mRNA con estructura Cap1 idéntica a la natural.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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CleanCap Reagent AU tiene una finalidad muy definida. Se fabricó para el recubrimiento capilar durante la transcripción, con estructura m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU, logrando mRNA con estructura Cap1 idéntica a la natural[1]. Se adapta perfectamente al RNA autorreplicante derivado de los genomas virales de RNA de cadena positiva, como el virus de la encefalitis equina venezolana, el virus del bosque Semliki y el virus Sindbis. El extremo 5'-AU abre los genomas de estos patógenos[2, 3]. El mRNA Cap1 supera al mRNA Cap0 obtenido con técnicas clásicas de caperuza cotranscripcional como el análogo de caperuza antirretroceso ARCA. Dentro de los orgsnismo vivos, muestra mayor actividad, mejor estabilidad y menor capacidad para generar respuestas inmunitarias[4]. Esta reacción se combina sin problemas con los nucleótidos trofosfatos modificados de la línea comercial GlpBio.
Este protocolo solo proporciona una guía, por favor modifíquela para satisfacer sus necesidades específicas.
CleanCap Reagent AU se utiliza para las reacciones de transcripción:
1. Agregue agua libre de RNase y NTPs al tubo de reacción.
2. Agregue CleanCap Reagent AU al tubo y al vórtice para mezclar. entrifugar brevemente para recoger el líquido en la parte inferior del tubo.
3. Añade un búfer de transcripción 10X. Vórtice para mezclae. Centrifugar brevemente para recoger el líquido en la parte inferior del tubo.
4. Añadir plantilla de DNA.
5. Agregue inhibidor de RNase murina, pirofosfatasa inorgánica de levadura y T7 RNA polymerase.
6. Mueve o invierta suavemente el tubo 10 veces para mezclar bien, luego centrifuga brevemente para recoger el líquido en la parte inferior del tubo.
7. Incubar a 37°C durante 2-3h.
Nota: Todos los reactivos deben estar estrictamente libres de RNase. Utilice tubos y botellas desechables sin RNase. Las superficies y las pipetas se pueden limpiar con RNaseZap para inactivar RNase. Si es posible, utilice pipetas dedicadas sin RNase. Evite el uso de pipetas que se hayan utilizado para la preparación de plásmidos RNase A.
| purity | ＞95.00% | Extinction Coefficient | 33,400 Lmol-1cm-1 at 258 nm |
| Formula | C31H42N12O25P4 (free acid) | M.Wt | 1106.6 g/mole (free acid) |
| Salt Form | Na+ | Concentration | {{1-2,4}102mM|{3}} |
| Buffer | H2O | Storage | -20°C or below, always avoid freeze-thaw cycles. |
| Sinónimos | CleanCap AU for Self-Amplifying mRNA, CleanCap Reagent AU for co-transcriptional capping of mRNA, m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU | Backbone | 5'-5'-Triphosphate |
| Base Analog | Adenosine, Uridine | Sugar Type | RNA |
| Nucleotide Category | Cap analogs | ||
| Applications | CRISPR, In vitro Transcription, Recombinases, TALENS, Transposases, Vaccine Development, Zinc Finger Nucleases | ||
Quality Control & SDS
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