Sisomicin sulfate

Líneas celulares

Método de preparación

La supervivencia de las células mutantes ΔpdtaS de M. smegmatis cultivadas en medio líquido con la adición de antibióticos seleccionados se estudió utilizando la metodología estándar de la unidad formadora de colonias (UFC). Las células de crecimiento activo desde la etapa logarítmica del crecimiento se diluyeron en medio 7H9 suplementado con OADC y Tween-80 a un OD600 de 0,1. Se utilizó Sisomicin sulfatea a una concentración final de 2,3 μg/ml. La cinética del crecimiento se midió registrando OD600 a las 3, 6, 9 y 24 horas después de la adición de antibióticos. En los puntos de tiempo de 9 y 24 horas, se extendieron diluciones en serie de células de 10 veces en agar 7H10 que contenía OADC. Las placas se incubaron a 37 °C durante 3-5 días, se contaron las colonias y los datos se trazaron usando Excel. Se realizó la prueba t de un estudiante para determinar la significación estadística entre los valores de prueba y control.

Condiciones de reacción

Áreas de aplicación

Modelos animales

Método de preparación

Veinte conejos que pesaban 2,2-4,4 kg fueron sometidos a traqueotomía después de la inducción de la anestesia. Se controló la ventilación mecánica para mantener la presión arterial de dióxido de carbono (PaCO2) entre 35-45mmHg. La presión arterial y el análisis de gases en sangre arterial se controlaron a través de una arteria carótida cateterizada. La vena yugular externa fue canulada para fluido (5% D/W, a una velocidad de 10 ml/kg/h) y administración de medicamentos. El tendón del gastrocnemio izquierdo fue cortado y asegurado a un transductor de desplazamiento de fuerza de tipo U. Se utilizó una almohadilla térmica para mantener la temperatura corporal por encima de 36 °C, y el músculo se alojó en un recinto transparente calentado por una lámpara de calor. Un termómetro en contacto con la superficie muscular midió la temperatura muscular. El nervio tibial izquierdo se cortó después de la disección del nervio ciático y se cubrió con aceite mineral. El nervio tibial cortado se estimuló directamente utilizando un estimulador y electrodos de aguja de acero de pared delgada de calibre 27. Los pulsos máximos de onda cuadrada (0,1 ms de duración) se entregaron a una velocidad de 0,1 Hz. La fuerza isométrica resultante de la tensión de contracción muscular y la presión arterial se registraron continuamente en un polígrafo de Nihon Kohden.

Cuando se obtuvo una contracción estable, se administró una dosis inicial de Sisomicin sulfate (20 mg/kg, n=7) por vía intravenosa, y se determinó la dosis inicial y el porcentaje máximo de inhibición de la contracción. Se administró Sisomicin sulfate adicional (10 mg/kg) para estudiar la respuesta a la inhibición de la contracción superior al 90%.

Forma de dosificación

Áreas de aplicación

References:
[1] Dadura K, P?oci?ska R, Rumijowska-Galewicz A, et al. PdtaS Deficiency Affects Resistance of Mycobacteria to Ribosome Targeting Antibiotics. Front Microbiol. 2017 Nov 3;8:2145.
[2] Matsukawa S, Suh JH, Hashimoto Y, et al. Neuromuscular blocking actions of the aminoglycoside antibiotics Sisomicin sulfate and micronomicin in the rabbit. Tohoku J Exp Med. 1997 Apr;181(4):471-3.