المراجع (Citations)
6 publicationsمنشورات الباحثين الذين استخدموا هذا المنتجالوصف (Description)
إن Coelenterazine هو لوسيفيرين بحري طبيعي ومنفذ للخلايا يعتبر Coelenterazine ركيزة لأنواع متعددة من إنزيمات اللوسيفيراز أو البروتينات الضوئية. كما يعد Coelenterazine مسبارا للكشف عن أيونات الكالسيوم وأنواع الأكسجين التقاعلية (Ex/Em=429/466nm).يمكن استخدام Coelenterazine في مقايسات الجينات المبلغة، والتصوير بالضيائية الحيوية داخل الكائن الحي، والكشف عن أيونات +Ca²، ونقل طاقة الرنين بالضيائية الحيوية، والدراسات المتعلقة بالإجهاد التأكسدي.
البروتوكول (Protocol)
بروتوكول استخدام الكويلينتيرازين [1–3]:
يوفر هذا البروتوكول دليلاً إرشادياً فقط؛ يُرجى التعديل وفقاً للاحتياجات الخاصة.تحضير محلول الصبغ:
(1) قم بإذابة الكويلينتيرازين في الميثانول لتحضير محلول تخزين بتركيز 4.7 ملي مولار. ملاحظة: قسّم محلول التخزين غير المستخدم إلى أجزاء وخزّنه عند -20 درجة مئوية أو -80 درجة مئوية محميّاً من الضوء. تجنب تكرار دورات التجميد والإذابة.
(2) خفّف محلول التخزين باستخدام منظم فوسفات البوتاسيوم بتركيز 0.1 مولار لتحضير محلول عمل بتركيز يتراوح بين 0.4 إلى 2.5 ميكرومولار. ملاحظة: اضبط تركيز العمل وفقاً للظروف الفعلية. حضّره طازجاً قبل كل استخدام.
الكشف عن أنواع الأكسجين التفاعلية في الميتوكوندريا (باستخدام ميتوكوندريا قلب الجرذ كمثال):
(1) اعزل ميتوكوندريا قلب الجرذ أو جسيمات الميتوكوندريا الفرعية (SMP). اضبط تركيز البروتين إلى حوالي 5 ملغ/مل.
(2) أضف 1 ملغ من معلق الميتوكوندريا أو جسيمات الميتوكوندريا الفرعية إلى 2.5 ميكرومولار من الكويلينتيرازين و2 ملغ/مل من NADH. قِس إشارة الضيائية التراكمية على الفور في غضون 15 ثانية.
صبغ الخلايا:
(1) استزرع الخلايا التي تعبر عن لوسيفيراز رينيلا. اغسل الخلايا مرة واحدة بمحلول عديم اللون.
(2) أضف 0.4 ميكرومولار من الكويلينتيرازين. احتضن في الحال عند 37 درجة مئوية بعيداً عن الضوء لمدة 6 ساعات.(3) التقط الصور باستخدام نظام التصوير بالضيائية الحيوية.
التصوير داخل جسم الفأر:
(1) احقن 2 ملغ/كغ من الكويلينتيرازين عبر الوريد الذنب للفئران الحاملة لأورام الطعوم الأجنبية التي تعبر بثبات عن لوسيفيراز رينيلا.(2) اترك الكويلينتيرازين يدور داخل الجسم الحي لمدة 5 دقائق تقريباً. استخدم نظام تصوير بالضيائية الحيوية لالتقاط صور الأورام الموضعية والنقائل. بعد التضحية بالحيوان، اسحق الأعضاء الرئيسية. اخلط 50 ميكرولتر من ركيزة الكويلينتيرازين مع 10 ميكرولتر من مستخلص الأنسجة. قم بالقياس الكمي باستخدام مقياس اللمعان.
احتياطات:
(1) يجب أن تتوافق التجارب على الحيوانات مع إرشادات رعاية ورفاهية الحيوان.
(2) من أجل سلامتك وصحتك، يُرجى ارتداء معطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء إجراء العملية.
وثائق المنتج (Product Documents)
البيانات البيولوجية (Biological Data)
الخصائص الكيميائية (Chemical Properties)
الحاسبات (Calculators)المولارية / التخفيف / الوزن الجزيئي / تحويل الوحدات / تركيبة داخل الجسم الحي / الذوبانية
Reviews
Review for Coelenterazine
- 5 Star100%
- 4 Star0%
- 3 Star0%
- 2 Star0%
- 1 Star0%
