CL264 |
Catalog No.GC39361
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CL264 est un ligand du récepteur de type toll 7 (TLR7) puissant et hautement spécifique.
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Cas No.: 1510712-69-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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CL264 est un ligand du récepteur de type toll 7 (TLR7) puissant et hautement spécifique. Les cellules immunitaires utilisent les récepteurs de type toll (TLR) pour détecter les motifs moléculaires associés aux pathogènes (PAMP), ce qui représente le point de départ de la réponse immunitaire innée.
En utilisant des concentrations de 0,5 à 10 µg/mL, la stimulation avec CL264 a entraîné une sécrétion dose-dépendante de TNF-α après 6 heures. Les cellules CAL-1 ont été stimulées avec CL264 (5 µg/mL) pendant 12 heures. Les cellules CAL-1 ont été ensemencées dans des plaques de 96 puits. Après un repos de nuit, les cellules ont été stimulées avec CL264, 9.2s RNA ou la combinaison des deux. Après l'incubation, le surnageant cellulaire a été analysé pour TNF-α, IL-6 et IFN-β par ELISA. CL264 a conduit à une libération robuste et dépendante du temps de TNF-α atteignant des niveaux absolus de 1347 pg/mL de TNF-α dans le surnageant. Les cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) stimulées avec CL264, IL-6, IL-8 et IL-12 ont été significativement stimulées.
L'agoniste TLR7 CL264, à une dose de 40 μg/injection aux jours 0, 3 et 6 après la greffe tumorale, a stimulé la croissance tumorale, et cet effet pro-tumorigène a été complètement perdu en l'absence de MDSC, tant chez les souris WT que chez les souris KO TLR7. L'effet d'exacerbation de la croissance tumorale de la stimulation TLR7 est médié par l'augmentation du nombre de MDSC dans le microenvironnement tumoral. La sécrétion de CCL2 et de GM-CSF par les cellules tumorales a été confirmée in vitro, avec une augmentation dans les surnageants des cellules stimulées par CL264, suggérant que CL264 pourrait stimuler le recrutement des MDSC via l'induction de CCL2 et de GM-CSF.
References:
[1].Hilbert T, Steinhagen F, et al. Synergistic Stimulation with Different TLR7 Ligands Modulates Gene Expression Patterns in the Human Plasmacytoid Dendritic Cell Line CAL-1. Mediators Inflamm. 2015;2015:948540.
[2].Dajon M, Iribarren K, et al. Toll like receptor 7 expressed by malignant cells promotes tumor progression and metastasis through the recruitment of myeloid derived suppressor cells. Oncoimmunology. 2018 Oct 11;8(1):e1505174.
| Expériences cellulaires [1]: | |
Lignées cellulaires | LLC (Lewis lung carcinoma), macrophages dérivés de la moelle osseuse (BMDMs) |
Méthode de préparation | Les macrophages ont été cultivés en présence ou en absence de CL264 pendant 24 h, avant que les cellules tumorales ne soient ajoutées et co-cultivées pendant 42 h. La thymidine radiomarquée a été utilisée pour détecter la croissance des cellules tumorales et a été ajoutée aux co-cultures 18 h avant la récolte des cellules. |
Conditions de réaction | Macrophages, CL264 (40 ng/ml), LLC co-cultivés pendant 42 h |
Domaines d'application | CL264 stimule les BMDMs et entraîne une inhibition des cellules LLC, mais seulement lorsqu'il est utilisé avec l'IFN-γ. |
| Expériences animales [2]: | |
Modèles animaux | Souris C57Bl/6J sauvages, souris Knock out TLR7 C57Bl/6J |
Méthode de préparation | Les cellules cancéreuses - cellules d'adénocarcinome pulmonaire murin LLC-luc (1E6 dans 100μl de PBS/injection) ont été injectées dans le flanc des souris réceptrices. Les souris ont ensuite reçu des injections intra-tumorales de CL264 aux jours 0, 3 et 6 après la greffe tumorale. |
Forme de dosage | 40 μg/injection, injection intra-tumorale |
Domaines d'application | L'injection intra-tumorale de l'agoniste TLR7 CL264 a induit un effet pro-tumorigène. CL264 dans les souris KO TLR7, effet similaire à celui observé chez les souris sauvages. Ces résultats démontrent clairement que l'effet pro-tumorigène de CL264 est médié par un effet sur TLR7 exprimé par les cellules malignes (plutôt que par les cellules immunitaires). |
Références : [1]. Müller E, Christopoulos PF, et al. Toll-Like Receptor Ligands and Interferon-γ Synergize for Induction of Antitumor M1 Macrophages. Front Immunol. 2017 Oct 26;8:1383. [2]. Dajon M, Iribarren K, et al. Toll like receptor 7 expressed by malignant cells promotes tumor progression and metastasis through the recruitment of myeloid derived suppressor cells. Oncoimmunology. 2018 Oct 11;8(1). | |
| Cas No. | 1510712-69-2 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C(O)CNC(C1=CC=C(CN2C(NC3=C(N)N=C(NCCCC)N=C23)=O)C=C1)=O | ||
| Formula | C19H23N7O4 | M.Wt | 413.43 |
| Solubility | DMSO : 25 mg/mL (60.47 mM; Need ultrasonic); H2O : < 0.1 mg/mL (insoluble) | Storage | Store at -20°C |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.4188 mL | 12.0939 mL | 24.1879 mL |
| 5 mM | 483.8 μL | 2.4188 mL | 4.8376 mL |
| 10 mM | 241.9 μL | 1.2094 mL | 2.4188 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 4 reference(s) in Google Scholar.)