Iohexol

Protocole d'angiographie par Micro-CT avec rehaussement dynamique

1. Préparation Pré-experimentale

(1) Peser les souris BALB/c (âgées de 8-12 semaines), et calculer la dose d'Iohexol: 25µl/g (=7.5mgI/g).

(2) Préparer le mélange anesthésique, le stériliser avec un filtre 0.2µm, conserver le mélange à l'abri de la lumière à 4°C et l'utiliser immédiatement après préparation.

(3) Ajouter 5ml d'Iohexol (300mgI/ml) à 5ml de solution saline stérile et mélanger pour obtenir 10ml de solution de travail à 150mI/ml, stériliser avec un filtre 0,2µm, conserver à l'abri de la lumière et utiliser immédiatement après préparation.

(4) Aspirer l'Iohexol dans une seringue de 1ml, chasser les bulles d'air et fixer la seringue sur la pompe à injection. Régler le débit: volume total injecté (µl) = 25µl × poids corporel (g). Temps d'injection = 45s → débit (µl/s) = volume total/45.

(5) Fixer la souris sur un tapis chauffant (37°C) et surveiller la température rectale en temps réel pour la maintenir entre 36.5 et 37.5°C.

2. Injection intraveneuse

(1) Nettoyer le tiers postérieur de la queue de la souris avec une compresse d'alcool et utiliser une lampe infrarouge pour aider à dilater la veine caudale.

(2)Insérer le cathéter, confirmer le reflux sanguin et le fixer; connecter l'autre l'extrémité du cathéter au tube prolongateur de la pompe à injection rempli d'Iohexol.

(3) Injecter lentement 20µl de NaCl à 0.9% pour vérifier que la voie est perméable sans fuite.

3. Procédure de balayage dynamique avec contraste

(1) Acquérir d'abord la séquence de base "pré-contraste" (paramètres exemple: 80kV; 500µA; projection à 360 degrés; 10min).

(2) Démarrer le balayage et déclencher simultanément la pompe à injection; commencer immédiatement le premier tour de balayage "post-contraste" après la fin de l'injection (45s).

(3) Répéter le balayage post-contrate toutes les 50s pour un total de 5 périodes; le processus entier dure environ 4.5min.

(4) Après le balayage, retirer lentement l'aiguille, appliquer une pression locale pour arrêter le saignement pendant 30 s; placer les souris sur le tapis chauffant pour récupération, et les remettre dans la cage une fois le réflexe de redressement revenu.

4. Observation Postoperatoire

(1) Observe la respiration, la couleur de la peau et l'activité à 0, 30 et 60min, noter toute réaction indésirable (convulsions, depression respiratoire, etc.).

(2) Fournir de l'eau glucosée à 5% dans les 24h pour favoriser l' excrétion de l'iode.

(3) Si plusieurs balayages avec contraste sont nécessaire, l'intervalle doit être ≥ 72h, et surveiller la créatinine sérique pour évaluer la fonction rénale.

5. Précautions

(1) Iohexol est un agent de contraste non ionique de faible osmolarité et peut être conservé à température ambiante; vérifier la présence de cristaux avant utilisation, et si présents, dissoudre Iohexol dans un bain-marie à 37°C.

(2)La profondeur de l'anesthésie doit être telle qu'il n'y ait pas de réflexe de retrait losque la patte est pincée; une anesthésie trop profonde peut provoquer une dépression respiratoire, et une anesthésie trop légère peut entraîner des artéfacts de mouvement.

(3) Si la période expérimentale est > 1h, administrer 0.3ml de solution saline tiède par voie intrapéritonéale toutes les 20 min pour prévenir la déshydratation et l'hypotension.

References:
[1] Yan D, Zhang Z, Luo Q, et al. A novel mouse segmentation method based on dynamic contrast enhanced micro-CT images[J]. PLoS One, 2017, 12(1): e0169424.