AMPPD (Lumi-Phos Plus) (Synonyms: Lumi-Phos Plus; Lumigen PPD; PPD) |
カタログ番号GC30019
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AMPPD (Lumi-Phos Plus)は1,2-ジオキセタン誘導体であり、アルカリ性ホスファターゼの超高感度化学発光基質として、生化学検出に広く使われる。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 122341-56-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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AMPPD (Lumi-Phos Plus)は1,2-ジオキセタン誘導体であり、アルカリ性ホスファターゼの超高感度化学発光基質として、生化学検出に広く使われる[1-2]。アルカリ性ホスファターゼの触媒の下、AMPPDは脱リン酸化を経験し、不安定な中間体を形成する。この中間体は分解し、ジオキセタンの構造の切断を起こし、波長が470nmの光を放出し、発光強度はアルカリ性ホスファターゼの濃度に比例している[3-4]。
References:
[1] Yue L, Liu YJ. Mechanism of AMPPD Chemiluminescence in a Different Voice. J Chem Theory Comput. 2013 May 14;9(5):2300-12.
[2] Tu L, Wang Y, Yang Y, et al. Spectroscopic study of the authentic emitter of AMPPD chemiluminescence in alkaline aqueous solution. Phys Chem Chem Phys. 2010 Jul 7;12(25):6789-94.
[3] Cate RL, Ehrenfels CW, Wysk M, et al. Genomic Southern analysis with alkaline-phosphatase-conjugated oligonucleotide probes and the chemiluminescent substrate AMPPD. Genet Anal Tech Appl. 1991 May;8(3):102-6.
[3] Cate RL, Ehrenfels CW, Wysk M, et al. Genomic Southern analysis with alkaline-phosphatase-conjugated oligonucleotide probes and the chemiluminescent substrate AMPPD. Genet Anal Tech Appl. 1991 May;8(3):102-6.
[4] Hai Z, Li J, Wu J,, et al. Alkaline Phosphatase-Triggered Simultaneous Hydrogelation and Chemiluminescence. J Am Chem Soc. 2017 Jan 25;139(3):1041-1044.
アルカリ性ホスファターゼの活性アッセイ
このプロトコールは研究のデータから整理されたものであり、参考までです。ご自分の具体的な実験需要に応じて調整する必要がある場合があります。
（1）酵素サンプルの調製：後続する使用のために、4℃、50mMの炭酸緩衝液（pH=9.5）で、アルカリ性ホスファターゼを含有するサンプル（例えば細胞溶解液上清または免疫検出複合体）を保存する。
（2）アルカリ性ホスファターゼの活性の検出：反応系には0.0125–0.4mMのAMPPD、50 mMの炭酸緩衝液(pH=9.5)と1mMのMgCl₂が含まれ、総体積は実験に応じて設置される。検出の前に、室温で20分間インキュベートする。
（3）光度計による検出：ルミノメーターで化学発光シグナルを測定し、10または30秒間の平均または積分光強度を記録する。
（4）フィルムイメージングの検出：膜に固定されているアルカリ性ホスファターゼ（例えばウエスタンブロットまたはドットブロット）については、膜をAMPPD基質でインキュベートし、イメージングのために、写真フィルムに暴露する。
注意事項：
1）化学発光反応の最適pHは9.0–9.5であり、ここで信号対雑音比（酵素反応/非酵素加水分解）は一番高い。
2）ご自分の安全と健康のために、操作時は実験用の白衣と使い捨ての手袋をご装着下さい。
References:
[1] Bronstein I, Edwards B, Voyta JC. 1,2-dioxetanes: novel chemiluminescent enzyme substrates. Applications to immunoassays. J Biolumin Chemilumin. 1989 Jul;4(1):99-111.
| Cas No. | 122341-56-4 | SDF | |
| 同義語 | Lumi-Phos Plus; Lumigen PPD; PPD | ||
| Canonical SMILES | COC1(C2=CC(OP(O)(O)=O)=CC=C2)C3(C(C4)CC5CC4CC3C5)OO1 | ||
| Formula | C18H23O7P | M.Wt | 382.34 |
| 溶解度 | Water : ≥ 125 mg/mL (326.93 mM) | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.6155 mL | 13.0774 mL | 26.1547 mL |
| 5 mM | 523.1 μL | 2.6155 mL | 5.2309 mL |
| 10 mM | 261.5 μL | 1.3077 mL | 2.6155 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 24 reference(s) in Google Scholar.)