ARCA (Synonyms: Anti Reverse Cap Analog, 3´-O-Me-m7G(5')ppp(5')G) |
カタログ番号GC16608
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ARCAは5′キャップアナログであり、抗逆転キャップアナログとして機能する。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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ARCAは5′キャップアナログであり、抗逆転キャップアナログとして機能する。ARCAは、in vitro転写の間に、mRNAの5′末端が正確な方向で結合することを保証する。m7Gの3′-OH位置でメチル基を導入することで、ARCAは、mRNAの5′末端への正確な方向の結合を保証し、in vitro転写の間に、逆の組み込みを阻止する。ARCAはmRNA翻訳の効率と安定性を増強する。ARCAは、癌、感染疾患とmRNAワクチンに関する研究に使える[1-4]。
ARCAを使った正確な方向のキャップ構造を持つmRNAの調製法[1]
このプロトコールは参考までです。実際のニーズに合わせてご調整願います。
（1）試薬の調製：ARCAを水または適切な緩衝液に溶解し、0.5mMの原液を調製する。0.5mM ATP、0.5mM CTP、0.5mM UTPと0.1mM GTP（ARCAとGTPのモル比は5:1）を含有するNTP混合物を調製する。SP6またはT7 RNAポリメラーゼ、DNAテンプレート、RNase阻害剤と転写緩衝液を調製する。
（2）In vitro転写反応系の構築：600ng DNAテンプレート、1U/μL RNase阻害剤、0.5mM ATP/CTP/UTP、0.1mM GTPと0.5mM ARCAを転写緩衝液に添加する。SP6またはT7 RNAポリメラーゼを添加する。
（3）mRNAの合成：37℃で1時間インキュベートする。2μL DNaseを添加し、37℃で20分間インキュベートし、テンプレートDNAを除去する。RNA生成物を精製し、正確な方向を持つARCAキャップ構造を持つmRNAを得る。
（4）ARCAキャップ付きmRNAの翻訳検証：ARCAキャップ付きmRNAをHEK293細胞（DMEM+10%FBS；37°C；5%CO2）にトランスフェクトし、またはウサギ網状赤血球ライセートを添加し、30℃で60分間インキュベートする。翻訳効率をルシフェラーゼ発光値で評価する。RT-qPCRを使い、残りのmRNAの割合をHEK293細胞で検出し、安定性を評価する。
注意事項：
（1）RNAの分解を阻止する為に、実験中に無RNaseの消耗品を使い、氷の上で操作を行う。
（2）ご自分の安全と健康の為に、操作時は白衣と使い捨ての手袋をご装着願います。
| Cas No. | SDF | ||
| 同義語 | Anti Reverse Cap Analog, 3´-O-Me-m7G(5')ppp(5')G | ||
| Canonical SMILES | OC1C(COP([O-])(OP([O-])(OP([O-])(OCC2OC(N3C=[N+](C)C4=C3N=C(N)NC4=O)C(O)C2OC)=O)=O)=O)OC(N5C=NC6=C5N=C(N)NC6=O)C1O | ||
| Formula | C22H32N10O18P3 (free acid) | M.Wt | 817.4 g/mol (free acid) |
| 溶解度 | Storage | Store at -20°C | |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.2234 mL | 6.117 mL | 12.2339 mL |
| 5 mM | 244.7 μL | 1.2234 mL | 2.4468 mL |
| 10 mM | 122.3 μL | 611.7 μL | 1.2234 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A liquid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 31 reference(s) in Google Scholar.)