コラゲナーゼ IA（Collagenase IA）は、細胞外マトリックスタンパク質の消化によく使われるタンパク分解性の酵素である[1]。コラゲナーゼ IAは特異的にプロコラーゲンに作用し、破壊し、その他のプロテアーゼと共に加水分解するが、線維素とグロブリンを加水分解しない。コラゲナーゼは、コーラゲンによく見られるPro-X-Glyc-Pro配列における中性アミノ酸とグリシンの結合を切断できる[2]。コラゲナーゼは、Ca2+とZn2+などの二価カチオンの活性を必要とする[3]。コラゲナーゼの活性は、エチレンジアミン四酢酸(EDTA)、ジチオスレイトール(DTT)、洗剤、ヘキサクロロシクロヘキサンと重金属イオン（Hg2+, Pb2+, Cd2+）に阻害される[4]。コラゲナーゼは比較的にマイルドで、生理学の温度とpH条件の下では、優れた分離能力を持ち、機械的な攪拌または特定の設備はいらない。この製品はBacillus histolyticus由来で、最適のpHが7-8で、酵素活性は≥125CDU/mg固体（CDU=コーラゲン消化単位）である。
活性の定義：pH7.5、25℃で、カルシウムイオンの存在下で、1単位のdi-GPA加水分解酵素は1分間ごとに、1.0μMのフラニルアクリロイル-Leu-Gly-Pro-Alaを加水分解する。1単位の中性プロテアーゼは、乾酪素を加水分解し、pH 7.5と37°Cで、5時間ごとに1.0μMのチロシンに相当する色素を製造する。pH7.6、25℃で、DTTの存在下で、各単位のクロストリパインは1分ごとに1.0μMのBAEEを加水分解する。
References:
[1] Sekhon B S. Matrix metalloproteinases–an overview[J]. Research and Reports in Biology, 2010: 1-20.
[2] Trabelsi O, Dumas V, Breysse E, et al. In vitro histomechanical effects of enzymatic degradation in carotid arteries during inflation tests with pulsatile loading[J]. Journal of the mechanical behavior of biomedical materials, 2020, 103: 103550.
[3] Eming S, Smola H, Hartmann B, et al. The inhibition of matrix metalloproteinase activity in chronic wounds by a polyacrylate superabsorber[J]. Biomaterials, 2008, 29(19): 2932-2940.
[4] Daboor S M, Budge S M, Ghaly A E, et al. Extraction and purification of collagenase enzymes: a critical review[J]. Am. J. Biochem. Biotechnol, 2010, 6(4): 239-263.