引用文献 (Citations)
1 publications本製品を使用した研究者による文献製品説明 (Description)
HBC (HBC 530)はGFP様の合成染料であり、最大の励起波長は485nmであり、最大の発光波長は530nmである[1]。HBCは、構造的に剛性の高い電子受容体と強力な電子供与体を備えており、長さが様々なRNAに結合し、強烈な蛍光を発する[2]。HBCが提供した独自の蛍光イメージングチャネルは、光度センサープラットフォームのエンジニアリングに広く使われ、よって多色RNA標識または細胞内RNA-RNA相互作用のイメージングを実現する[3]。HBCは、腫瘍特異性プロテアーゼのin situ局在化、in vitro(体外)イメージング分析実験における動物光学的分析に使える[4]。
References:
[1] Chen X, Zhang D, Su N, et al. Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs[J]. Nature Biotechnology, 2019, 37(11): 1287-1293.
[2] Bereiter R, Micura R. Synthesis of HBC fluorophores with an electrophilic handle for covalent attachment to Pepper RNA[J]. Beilstein Journal of Organic Chemistry, 2025, 21(1): 727-735.
[3] Tang H, Peng J, Peng S, et al. Live-cell RNA imaging using the CRISPR-dCas13 system with modified sgRNAs appended with fluorescent RNA aptamers[J]. Chemical Science, 2022, 13(47): 14032-14040.
[4] Xie X, Sun Y, Peng J, et al. Collagen anchoring protein-nucleic acid chimeric probe for in situ in vivo mapping of a tumor-specific protease[J]. Analytical Chemistry, 2023, 95(50): 18487-18496.
実験プロトコル (Protocol)
HBC530に基づいたメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)の分析
このプロトコールはあくまでもガイドラインのみを提供し、ご自分の特定のニーズに合わせてご調整願います。
1.HBC530溶液の調製:
2μM HBC530作業溶液を1mM HBC530原液から調製した(DMSOに溶解)。注:作業溶液は、実験当日に新鮮に調製しなければならない。
2.細胞外マトリックス(ECM)におけるHBC530によるMMP-2のイメージング
(1)ECMにおけるMMP-2のイメージングのため、HePG2細胞をTGF-βで24時間前処理した。
(2)10μlの100μM タンパク質-核酸キメラプローブ(PNCP)をまず、37℃、反応バッファー(50mM HEPES、50mM NaCl、10μM MnCl2と1mM MgCl2)で6時間調製し、その後、1μM PNCPと4mM rNTPを含有する100μlの転写バッファーを細胞培養皿に2時間添加した。
(3)2μM HBC530作業溶液をHepG2で15分間インキュベートした。マイクロプレートリーダーを使い、蛍光シグナルを測定、記録した。
3.注意事項
(1)暗所での操作:4℃で、HBC530作業溶液の半減期は4時間であり、必要に応じて調製、使用するべきである。
(2)実験の間に、安全のためには保護用の手袋を着用しなければならない。
(3)この実験に使われた試薬は化学研究の目的のみに使われる。
References:
[1] Xie X, Sun Y, Peng J, et al. Collagen anchoring protein-nucleic acid chimeric probe for in situ in vivo mapping of a tumor-specific protease[J]. Analytical Chemistry, 2023, 95(50): 18487-18496.
製品資料 (Product Documents)
化学的性質 (Chemical Properties)
ストック溶液は、-80°Cで保存する場合は6か月以内、-20°Cで保存する場合は1か月以内に使用してください。
溶解性を高めるには、チューブを37°Cに温め、適切な時間超音波処理してください。
計算ツール (Calculators)モル濃度 / 希釈 / 分子量 / 単位変換 / in vivo製剤 / 溶解度
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