Iron dextran

細胞株

HepG2細胞

準備方法

1%のペニシリン-ストレプトマイシンと10%のウシ胎児血清を添加したHG-DMEM培地を含有する25cm²のフラスコでHepG2細胞株を培養した。細胞を、5% CO₂の加湿環境で37℃で維持した。細胞毒性の実験について、1ウェルあたり10000の生細胞の密度で、無菌96ウェルのプレートにHepG2細胞を播種し、37℃と5% CO₂で一晩中培養した。最初のステップで、細胞を様々な濃度のTQ (0.5-300×10³nM)とIron dextran (1.9-4000µg/ml)で24時間処理し、細胞の生存率をMTT法で別途測定した。次のステップで、HepG2細胞を安全の用量のTQ (1.8-15×10³nM)を事前処理し、その後は様々な濃度のIron dextranに暴露した。24時間後、0.5mg/mlのMTT試薬を各ウェルに添加し、4時間培養した。最終的に、100μlのジメチルスルホキシド（DMSO）を各ウェルに添加し、formazan結晶を溶解し、吸光度における変化を、マイクロプレートリーダーで570nmで測定した。

反応条件

1.9-4000µg/ml；24時間

アプリケーション

体外で、Iron dextran(1.9–4000μg/ml；24時間)はHepG2細胞に対し一定の細胞毒性を示し、半分阻害濃度(IC₅₀)は1178μg/mlである。TQ（チモキノン）と併用された時、特定の用量のTQはその毒性を増強する。

動物モデル

8週齢の雄C57BL/6

準備方法

8週齢のマウスを、ほぼ無病原体の環境（温度は20°C ± 2°Cで、湿度は50%–60%、12時間の光/闇循環）で飼育し、1ポリプロピレンケージあたり4匹の動物で、植物と水を自由に摂取させた。200mg/kg Iron dextranをマウスに、1、2、3または4週間、二日ごとに腹腔内注射した。対照のマウスに同量の生理食塩水を注射した。

投与形態

200mg/kg；1、2、3または4週間；腹腔内

アプリケーション

Iron dextranはマウスの肝臓と脾臓で、鉄過剰症とCTSB/CTSD上方制御を誘発する。

References:
[1] Ghasemi F, Ghaffari F, Omidifar N, Taheri Azandaryani M, Nili-Ahmadabadi A. Hepatic Response to the Interaction Between Thymoquinone and Iron-Dextran: an In Vitro and In Vivo Study. Biol Trace Elem Res. 2023 Mar;201(3):1358-1367.
[2] Liang M, Chen L, He Q, Mi X, Qu L, Xie J, Song N. Intraperitoneal injection of iron dextran induces peripheral iron overload and mild neurodegeneration in the nigrostriatal system in C57BL/6 mice. Life Sci. 2023 May 1;320:121508.