ML334は、細胞透過性の強力なNRF2活性化剤である。これはKeap1-NRF2タンパク質間相互作用の阻害を通じて作用する。ML334は競合的表面プラズモン共鳴(SPR)アッセイにおいて、解離定数(Kd)1μMのKeap1に対する結合親和性を示した。さらに、ML334は蛍光偏光(FP)アッセイにおいてNrf2ペプチドと競合し、IC50が1.6μMを示した。
ML334(100μM、3時間)はHEK293細胞において核因子(erythroid-derived 2)-like 2(NRF2)の発現と核内移行を誘導する。一方、ML334処理は、HEK293細胞においてHO-1およびTRX1タンパク質の発現を誘導した。ML334誘導(50μM、48時間)のNrf2の過剰発現は、心臓線維芽細胞におけるパナックストリオールサポニン(PTS)の抗線維化効果を強化した。
[1]. Hu L, Magesh S, Chen L, Wang L, Lewis TA, Chen Y, Khodier C, Inoyama D, Beamer LJ, Emge TJ, Shen J, Kerrigan JE, Kong AN, Dandapani S, Palmer M, Schreiber SL, Munoz B. et,al. Discovery of a small-molecule inhibitor and cellular probe of Keap1-Nrf2 protein-protein interaction. Bioorg Med Chem Lett. 2013 May 15;23(10):3039-43. doi: 10.1016/j.bmcl.2013.03.013. Epub 2013 Mar 14. PMID: 23562243; PMCID: PMC3648997.
[2]. Shen J, Magesh S, et,al. Enantiomeric characterization and structure elucidation of LH601A using vibrational circular dichroism spectroscopy. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. 2018 Mar 5;192:312-317. doi: 10.1016/j.saa.2017.11.033. Epub 2017 Nov 21. PMID: 29172127; PMCID: PMC10544735.
[3]. Wang L, Lewis T. et,al. The identification and characterization of non-reactive inhibitor of Keap1-Nrf2 interaction through HTS using a fluorescence polarization assay. 2012 Dec 17 [updated 2013 Sep 16]. In: Probe Reports from the NIH Molecular Libraries Program [Internet]. Bethesda (MD): National Center for Biotechnology Information (US); 2010–. PMID: 24260785.
[4]. Wen X, Thorne G, et,al. Activation of NRF2 Signaling in HEK293 Cells by a First-in-Class Direct KEAP1-NRF2 Inhibitor. J Biochem Mol Toxicol. 2015 Jun;29(6):261-6. doi: 10.1002/jbt.21693. Epub 2015 Feb 12. PMID: 25683455; PMCID: PMC4713195.
[5]. Yao H, He Q, et,al. Panaxatriol saponin ameliorates myocardial infarction-induced cardiac fibrosis by targeting Keap1/Nrf2 to regulate oxidative stress and inhibit cardiac-fibroblast activation and proliferation. Free Radic Biol Med. 2022 Sep;190:264-275. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2022.08.016. Epub 2022 Aug 14. Erratum in: Free Radic Biol Med. 2023 Jun;202:34. PMID: 35977659.
















