引用文献 (Citations)
1 publications本製品を使用した研究者による文献製品説明 (Description)
ポリエチレンイミンリニア(PEI)(Polyethylenimine linear)は遺伝子キャリアに使われる親水性の陽イオン性の重合体であり、高いトランスフェクション効率を持っている[1]。ポリエチレンイミンリニアは負に帯電した染料の化学物質を改善でき、ポリリジンと似たような作用で、プライマーとしてよく使われている[2]。ポリエチレンイミンリニアは細胞のトランスフェクションに使われることができる。ポリエチレンイミンリニアはDNAとその他の負に帯電した生体分子に結合でき、毒性の低く、効率の高い細胞トランスフェクション剤である[3]。ポリエチレンイミンリニアは核酸薬物の標的送達に使われることができる。塩化物の流入を誘発し、その後リソソームがプロトン化される時、水をリソソームの中に浸透させ、リソソームを破裂させと核酸を細胞質に放出すること[4]。この産品の分子量は10kDaである。
References:
[1] Jeong J.H., Song S.H., Lim D.W, et al. DNA transfection using linear poly(ethylenimine) prepared by controlled acid hydrolysis of poly(2-ethyl-2-oxazoline)[J]. Journal of Controlled Release. 2001(73): 391-399.
[2]Yan Li, Shu Xiong, et al. Loose nanofiltration membrane with highly-branched SPEI/PEI assembly for dye/salt textile wastewater treatment[J].Journal of Environmental Chemical Engineering. 2021.
[3]Wang C, Zhang Z, Liu Y, et al. Recent Progress on Nonviral Delivery Carriers for CRISPR/Cas9 Systems[J]. Mater. Matters, 2020, 15: 104-111.
[4]Piotrowski-Daspit A S, Kauffman A C, Bracaglia L G, et al. Polymeric vehicles for nucleic acid delivery[J]. Advanced drug delivery reviews, 2020, 156: 119-132.
実験プロトコル (Protocol)
この実験プランはガイドとしてだけ使われます。お客様にはご自分のニーズに合わせてプランをご調整してください。
1. 溶液の調製
(1) 保存溶液の調製:凍結保存された固体を室温に平衡させて、滅菌水でポリエチレンイミンリニアを溶解し、濃度が1mg/mLの保存溶液を調製すること。
注:未使用の保存溶液は一定分量に分けて、重複した凍結と融解を避ける為には-20°Cあるいは-80°Cの暗い場所で保存すること。
(2) 作業溶液の調製:正式な実験の前は、保存された溶液を除菌水(または血清のない培地)で必要な作業濃度(例えば250 μg/mL)まで薄めること。
注:実際の状況に応じて最適な作業濃度を調整するか、あるいは文献を参考にしてご自分で勾配濃度を設定すること。作業液は調製してすぐに使う必要がある。
2. ポリエチレンイミンリニアを用いた293T細胞の一時的なトランスフェクションの手続き [1](文献より作成、参考までに)
(1) 細胞の播種:トラスフェクションの一日前に、指数関数的な成長期にある293T細胞を直径6 cmの培養皿に播種する。細胞の成長が50~70%のコンフルエンスに達することを確保すること。
(2) 培地の置き換え:細胞の培地を除去し、血清のない培地で置き換えること。
(3) DNA-PEI複合体の調製:240 μLのDNA溶液(32μg/mL)を調製すること。180μLの滅菌PEI溶液(250μg/mL)を加えること。軽くボルテックスして混合し、室温で 30 分間培養すること。
(4) DNA-PEI複合体の添加:細胞に複合体の液滴を滴下し、5%のCO2のインキュベーターで6時間培養する。
(5) 培地の置き換え:6時間経過した後、DNA-PEI複合体の含む培地をウシ胎児血清(FBS)を添加したDMEM培地に置き換えること。
(6) 培養と遺伝子の発見:引き続きCO2のインキュベーターに48時間培養して、遺伝子の発見を分析すること。
注:この実験のプロトコルは、細胞のトランスフェクション実験におけるポリエチレンイミンリニアの使用の為の参考資料としてのみ使われる。ご自身の実験のニーズに合わせて具体的な手続きを調整してください。トランスフェクションの効率と細胞毒性を評価する為に、未使用の細胞と既知の効率の高いトランスフェクション試薬の使用など、必要な対照実験を行ってください。
References:
[1] Wang W , Zheng Q , Yu C ,et al.WSV056 Inhibits Shrimp Nitric Oxide Synthase Activity by Downregulating[J].Frontiers in microbiology, 2021, 12:796049.
製品資料 (Product Documents)
化学的性質 (Chemical Properties)
ストック溶液は、-80°Cで保存する場合は6か月以内、-20°Cで保存する場合は1か月以内に使用してください。
溶解性を高めるには、チューブを37°Cに温め、適切な時間超音波処理してください。
計算ツール (Calculators)モル濃度 / 希釈 / 分子量 / 単位変換 / in vivo製剤 / 溶解度
Reviews
Review for Polyethylenimine linear (MW:10000)
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