인용 문헌 (Citations)
2 publications이 제품을 사용한 연구자들의 논문제품 설명 (Description)
CY7은 단백질, 항체, 소분자 화합물 등에 표시하는 데 흔히 사용되는 시아닌 함유 형광 염료이다. 그의 최대 자극/방출 파장은 각각 745/800nm이다. CY7의 기본 구조는 공액 이중 결합계를 가진 환상 화합물이다. 이는 원적외선 영역에서 탁월한 형광 특성을 가지고 있고 광 안정성이 좋은다[2]. CY7은 장파장, 조절 가능한 흡수와 방출, 높은 흡수 계수, 좋은 수용성, 비교적 간단한 합성을 특징으로 하는 시아닌 화합물이다[3].
CY7은 보통 활성 에스테르나 아지드의 형태로 존재하고 공가결합을 통해 단백질과 핵산 같은 생물학적 분자와 결합해 표시할 수 있다[4]. CY 염료와 단백질의 최적 몰비는 약 10:1이다[5]. CY7은 넓은 범위의 응용 분야를 가지고 있다. 생체 표지물와 세포 영상화에 적합하고 핵산 검출, 단백질 분석, 약물 선별에도 사용할 수 있다[6]. 이 제품의 분자량은 682.85이다. 연구용으로만 사용되고 식품, 의약품, 의료기기, 화장품에는 적합하지 않다.
References:
[1] Zhang R, Yang J, Radford D C, et al. FRET Imaging of Enzyme‐Responsive HPMA Copolymer Conjugate[J]. Macromolecular bioscience, 2017, 17(1): 1600125.
[2] Yuan L, Lin W, Zheng K, et al. Far-red to near infrared analyte-responsive fluorescent probes based on organic fluorophore platforms for fluorescence imaging[J]. Chemical Society Reviews, 2013, 42(2): 622-661.
[3] Pandey R K, James N, Chen Y, et al. Cyanine dye-based compounds for tumor imaging with and without photodynamic therapy[J]. Heterocyclic Polymethine Dyes: Synthesis, Properties and Applications, 2008: 41-74.
[4] Gerowska M, Hall L, Richardson J, et al. Efficient reverse click labeling of azide oligonucleotides with multiple alkynyl Cy-Dyes applied to the synthesis of HyBeacon probes for genetic analysis[J]. Tetrahedron, 2012, 68(3): 857-864.
[5] Yu H, Chao J, Patek D, et al. Cyanine dye dUTP analogs for enzymatic labeling of DNA probes[J]. Nucleic Acids Research, 1994, 22(15): 3226-3232.
[6] Ntziachristos V, Schellenberger E A, Ripoll J, et al. Visualization of antitumor treatment by means of fluorescence molecular tomography with an annexin V–CY7. 5 conjugate[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2004, 101(33): 12294-12299.
실험 프로토콜 (Protocol)
이 프로토콜은 단지 가이드를 제공하고 특정 필요에 따라 수정해 주시기 바랍니다.
1.용액 준비
(1) 작업 용액: CY7 고체를 DMSO에 녹여 최종 농도를 10 mM으로 만듭니다.
노트: 작업 용액은 즉시 준비하고 사용해야 합니다. 사용 전에 500 µg/mL의 응축 용액(제품번호: GA11126)을 사용해야 후속 라벨링 실험을 진행할 수 있습니다.
2. CY7로 단백질을 표지하는 실험 절차
(1) 단백질 준비: 단백질을 기본 아민(트리스나 글리신 등)과 암모늄 이온이 없는 pH 8.5의 버퍼에 녹이고 농도를 2-10 mg/mL로 준비하고 최적의 표지 효율을 얻습니다. pH가 8.0보다 낮다면 1M 중탄산나트륨으로 조정합니다.
(2) CY7 작업 용액의 양 계산: 표지 반응에 필요한 CY7(MW=682.85)의 양은 표지할 단백질의 용량 의존적으로 다릅니다. CY 염료와 단백질의 최적 몰비는 약 10:1입니다.
(3) 라벨링 반응: 계산된 CY7 작업용액의 부피를 가져와 단백질 샘플 용액에 천천히 추가하고 부드럽게 흔들고 반응 튜브의 바닥에 샘플을 모으기 위해 잠시 원심분리합니다. 단백질 샘플이 변성되고 비활성화되지 않도록 격렬한 혼합은 피합니다.
(4) 배양 반응: 반응 튜브를 어두운 곳에 두고 실온이나 4°C에서 부드럽게 흔들고 60분 동안 반응을 시킵니다. 10-15분마다 두 반응물을 완전히 혼합하고 라벨링 효율을 높이기 위해 반응 튜브를 몇 번 부드럽게 뒤집습니다. 라벨링 시간은 2-18시간이고 라벨링 비율과 시간은 라벨링 효과 의존적으로 조정합니다.
노트:
(1) 이 제품은 비활성화된 형광 염료입니다. 이 제품을 펩타이드와 단백질과 같은 생물학적 분자에 표시하려면 먼저 카르복실산으로 활성화해야 합니다. 활성화된 형태가 필요하다면 sulfo-Cyanine5 NHS Ester (제품번호: GC59174)을 추천합니다.
(2) 이 프로토콜은 CY7을 사용하고 단백질을 표지하는 실험에 대한 지침을 제공합니다. 다른 문헌과 특정 실험 요구 사항에 따라 조정할 수 있습니다. 반응에 간섭할 수 있는 오염물질을 방지하기 위해 무균 환경에서 작업을 수행해야 합니다. 반응 시약과의 직접 접촉을 피하도록 합니다.
제품 문서 (Product Documents)
화학적 특성 (Chemical Properties)
저장 용액은 -80°C 보관 시 6개월 이내, -20°C 보관 시 1개월 이내에 사용하십시오.
용해도를 높이려면 튜브를 37°C로 데운 뒤 적절한 시간 동안 초음파 처리하십시오.
계산 도구 (Calculators)몰 농도 / 희석 / 분자량 / 단위 변환 / 생체 내 제형 / 용해도
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