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Bilirubin

Catalog No.: GN10555Purity:>98.00%Synonyms: Hematoidin, NSC 26685
Bilirubin, un producto de descomposición amarilla del catabolismo hemémico, inhibe la escisión de F485-rVWF73-H, D633-rVWF73-H, y GST-rVWF71-11K por ADAMTS13, con los valores de IC50 de 13μM, 70μM y 17μM, respectivamente

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Bilirubin
Cas No.: 635-65-4
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Descripción (Description)

Bilirubin, un producto de descomposición amarilla del catabolismo hemémico, inhibe la escisión de F485-rVWF73-H, D633-rVWF73-H, y GST-rVWF71-11K por ADAMTS13, con los valores de IC50 de 13μM, 70μM y 17μM, respectivamente[1]. Bilirubin es el producto de degradación definitivo de la hemoglobina y sirve como marcador de diagnóstico de trastornos hepáticos y sanguíneos[2].

In vitro, el tratamiento con Bilirubin a 0.4μM durante 24h restauó significativamente la viabilidad celular tanto en condiciones hipóxicas (5% de O2) como hiperóxicas (80% de O2) y las respuestas inducidas por el estrés oxidativo atenuadas en células alveolares de rata tipo II [3]. El tratamiento de las células estrelladas hepáticas de rata con 20mg/L de bilirubin durante 24 horas inhibió significativamente la viabilidad celular, disminuyó el nivel de expresión de proteínas de la actina muscular α-lisa y promovió la apoptosis celular[4]. El tratamiento con Bilirubin a 600μM durante 20 minutos atenuó significativamente la actividad bactericida de E. coli en neutrófilos humanos aislados[5].

In vivo, el tratamiento con Bilirubin a través de inyecciones intraperitoneales dos veces al día a 25mg/kg durante 10 días puede inhibir eficazmente el crecimiento del tumor y prolongar el tiempo de supervivencia de los ratones 14 días después del establecimiento del modelo de tumor trasplantado[6]. Las ratas de Sprague Dawley fueron inyectadas por vía intravenosa con 60mg/kg de Bilirubin en 5 minutos la región del hipocampo CA3 de las ratas mostró prolongación de las latencias máximas y una disminución de las pendientes de los potenciales evocados[7]. El tratamiento con Bilirubin (100 mg/kg dos veces al día; i.p.) durante dos semanas suprimió eficazmente la encefalomielitis autoinmune experimental en ratones SJL/J[8].

References:
[1] Lu R N, Yang S, Wu H M, et al. Unconjugated bilirubin inhibits proteolytic cleavage of von Willebrand factor by ADAMTS13 protease[J]. Journal of Thrombosis and Haemostasis, 2015, 13(6): 1064-1072.
[2] Fevery J. Bilirubin in clinical practice: a review[J]. Liver International, 2008, 28(5): 592-605.
[3] Endesfelder S, Schmitz T, Bührer C. Bilirubin Exerts Protective Effects on Alveolar Type II Pneumocytes in an In Vitro Model of Oxidative Stress[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2024, 25(10): 5323.
[4] Tang Y, Zhang Q, Zhu Y, et al. Low concentrations of bilirubin inhibit activation of hepatic stellate cells in vitro[J]. Molecular Medicine Reports, 2017, 15(4): 1647-1653.
[5] Arai T, Yoshikai Y, Kamiya J, et al. Bilirubin impairs bactericidal activity of neutrophils through an antioxidant mechanism in vitro[J]. Journal of Surgical Research, 2001, 96(1): 107-113.
[6] Ollinger R, Kogler P, Troppmair J, et al. Bilirubin inhibits tumor cell growth via activation of ERK[J]. Cell Cycle, 2007, 6(24): 3078-3085.
[7] Zhang L, Liu W, Tanswell A K, et al. The effects of bilirubin on evoked potentials and long-term potentiation in rat hippocampus in vivo[J]. Pediatric research, 2003, 53(6): 939-944.
[8] Liu Y, Li P, Lu J, et al. Bilirubin possesses powerful immunomodulatory activity and suppresses experimental autoimmune encephalomyelitis[J]. The Journal of Immunology, 2008, 181(3): 1887-1897.

Protocolo (Protocol)

Experimentos celulares [1]:

Líneas celulares

Células alveolares de rata tipo II

Método de preparación

Las células alveolares de rata tipo II (AEC II) se sembraron a una densidad de 2,5×104 células /cm2 en medio completo F12 de Ham y se cultivaron durante 24 h antes del procesamiento. Bilirubin se disolvió en 0,1M de NaOH y se filtró asépticamente. La concentración de la solución de caldo de Bilirubin se ajustó a 1 mM con agua estéril. Las aliquotas de la solución de stock se pueden almacenar en tubos oscuros a -20 °C hasta su uso posterior. El día del experimento, se preparó una solución de trabajo fresca de bilirrubina con albúmina sérica bovina (BSA), disuelta en solución tampón de fosfato (PBS, pH 7,4) a una concentración del 3% (p/v) y filtrada asépticamente. Se utilizaron más diluciones en medio celular completo para ajustar la concentración final de Bilirubin (0,1, 0,2, 0,3 y 0,4 μM). Para evitar la fotoisomerización de Bilirubin, todos los estudios se realizaron con poca luz. Un día después de la inoculación (DIV 1), las células AEC II se colocaron en una incubadora celular adecuada equipada con sensores de oxígeno y expuestas a diferentes concentraciones de oxígeno (5%, 21% y 80%). Los tiempos de exposición se fijaron en 4 h y 24 h, y las células se dejaron sin tratar o tratadas con Bilirubin en el medio durante 24 h. Luego, se retiró el medio, las células se lavaron una vez con PBS y se añadió medio fresco que contenía solución de MTT a una concentración final de 0,5 mg/mL. Después de 4 horas, para disolver el formazán, se añadió una mezcla de detergente y disolvente orgánico (dimetilsulfóxido; dodecil sulfato de sodio; ácido acético glacial) y se agitó durante 15 minutos. La absorbancia de las células AEC II se midió a 570 nm utilizando un lector de microplacas.

Condiciones de reacción

0,1, 0,2, 0,3 y 0,4 μM; 24h

Áreas de aplicación

El tratamiento con Bilirubin a 0,4 μM restauró significativamente la viabilidad celular tanto en condiciones hipóxicas (5% O2) como hiperóxicas (80% O2) y redujo la muerte celular.
Experimentos con animales [2]:

Modelos animales

Ratones desnudos BALB/c

Método de preparación

Los ratones desnudos BALB/c se mantuvieron en condiciones específicas libres de patógenos, se suministraron alimentos y agua ad libitum. Se inyectaron 2,5×106 células de cáncer de colon HRT-18 por vía subcutánea en el flanco inferior de los ratones desnudos BALB/c. A los 14 días, el tratamiento se inició mediante la inyección de 25 mg/kg de Bilirubin o PBS dos veces al día por vía intraperitoneal durante 10 días, y los diámetros del tumor se midieron diariamente utilizando un calibrador. Los resultados se expresan como media ± SD o media ± SEM cuando se indica.

Forma de dosificación

25 mg/kg dos veces al día durante 10 días; i.p.

Áreas de aplicación

El tratamiento con Bilirubin inhibió potentemente el crecimiento tumoral en ratones y prolongó la supervivencia.

References:
[1] Endesfelder S, Schmitz T, Bührer C. Bilirubin Exerts Protective Effects on Alveolar Type II Pneumocytes in an In Vitro Model of Oxidative Stress[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2024, 25(10): 5323.
[2] Ollinger R, Kogler P, Troppmair J, et al. Bilirubin inhibits tumor cell growth via activation of ERK[J]. Cell Cycle, 2007, 6(24): 3078-3085.

Documentos del producto (Product Documents)

Purity:>98.00%Appearance:A solid

Propiedades químicas (Chemical Properties)

N.º CAS
635-65-4
Sinónimos
Hematoidin, NSC 26685
Nombre químico
3-[2-[[3-(2-carboxyethyl)-5-[(Z)-(3-ethenyl-4-methyl-5-oxopyrrol-2-ylidene)methyl]-4-methyl-1H-pyrrol-2-yl]methyl]-5-[(Z)-(4-ethenyl-3-methyl-5-oxopyrrol-2-ylidene)methyl]-4-methyl-1H-pyrrol-3-yl]propanoic acid
SMILES
CC1=C(NC(=C1CCC(=O)O)CC2=C(C(=C(N2)C=C3C(=C(C(=O)N3)C)C=C)C)CCC(=O)O)C=C4C(=C(C(=O)N4)C=C)C
Fórmula molecular
C33H36N4O
Peso molecular
584.66
Solubilidad
≥ 8.85mg/mL in DMSO
Almacenamiento
Store at -20°C
Consejos generales
Seleccione un disolvente adecuado según los datos de solubilidad del producto. Una vez preparada, divida la solución madre en alícuotas para evitar ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Utilice las soluciones madre en un plazo de 6 meses si se conservan a -80°C, o de 1 mes si se conservan a -20°C.
Para mejorar la solubilidad, caliente el tubo a 37°C y soníquelo durante un periodo adecuado.
Condiciones de envío
Las muestras de evaluación se envían con acumuladores de frío. Los demás tamaños se envían a temperatura ambiente o, previa solicitud, con acumuladores de frío.

Calculadoras (Calculators)Molaridad / Dilución / Peso molecular / Conversión de unidades / Formulación in vivo / Solubilidad

g/mol

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