L-Glutamic acid

Líneas celulares

Método de preparación

Para aclarar el efecto de las altas concentraciones de L-Glutamic acid en el proceso de fusión de las células C2C12, las células C2C12 que se habían diferenciado durante 3 días en presencia de L-Glutamic acid 0-5mM se marcaron usando inmunofluorescencia con un anticuerpo de miosina muscular antiesquelética. Se analizaron el fenotipo celular y los recuentos nucleares para evaluar la fusión de miocitos. Las células positivas para la cadena pesada de miosina (MHC) con tres o más núcleos se definieron como células fusionadas. Para determinar si las altas concentraciones de L-Glutamic acid afectan directamente el proceso de fusión de las células C2C12, las células que habían sido diferenciadas durante 3 días (cuando el nivel de expresión de MHC de contracción rápida alcanza una meseta) fueron estimuladas con L-Glutamic acid 5mM durante 2 días.

Las células C2C12 se diferenciaron durante 2 días en presencia de L-Glutamic acid (0, 0,3, 1 o 5 mM), seguido del análisis de la expresión de mGluR5 y NMDAR en la membrana plasmática y las células enteras utilizando Western blotting. La N-caderina o GAPDH se utilizó como estándar interno. Después de que las células C2C12 se diferenciaran durante 3 días, se diferenciaron aún más durante 2 días en presencia de ácido L-glutámico (0, 0,3, 1 o 5 mM). La expresión de mGluR5 y NMDAR en células enteras se analizó utilizando Western blotting.

Condiciones de reacción

Áreas de aplicación

Modelos animales

Método de preparación

Los animales se dividieron en cuatro grupos, cada uno de los cuales comprendía 22 ratones, que eran respectivamente el grupo de operación de farsa (SO), el grupo de isquemia-reperfusión (IR), el grupo tratado con L-Glutamic acid (L-GA) 400 μM/kg y el grupo tratado con memantina (MN) 20 mg/kg. Las pruebas se realizaron en diferentes intervalos de tiempo después de la isquemia-reperfusión (0, 24, 48 y 72h). Se administraron L-Glutamic acid (intravenoso) y MN (intraperitoneal) 30 minutos antes de la cirugía. A los ratones SO e IR se les administraron solución salina (intraperitoneal). Los tratamientos farmacológicos se continuaron cada 24 horas después de la IR hasta el final del estudio.

Las mediciones conductuales (a las 24, 48 y 72 horas después de la IR) y del flujo sanguíneo cerebral (a las 0, 24, 48 y 72 horas después de la IR) se realizaron 30 minutos después de la administración del medicamento o del vehículo por la mañana. Después de las pruebas de comportamiento, las mediciones del flujo sanguíneo cerebral (CBF) se realizaron bajo anestesia leve con éter. Después de la medición de CBF, las ratonas fueron sacrificadas. La eutanasia se realizó en una cámara de anestesia utilizando algodón empapado en éter para inducir depresión respiratoria. Posteriormente, el cerebro fue disecado del cráneo. Luego, el cerebro fue microdiseccionado en la corteza, el cuerpo estriado y el hipocampo para la estimación de neurotransmisores y neurobioquímicos.

Forma de dosificación

Áreas de aplicación

References:
[1] Ban H, Nobe K, Kobayashi S. Inhibitory effects of high extracellular L-glutamate concentrations on skeletal myogenesis. Sci Rep. 2025 May 19;15(1):17364.
[2] Ramanathan M, Abdul KK, Justin A. Low dose of L-glutamic acid attenuated the neurological dysfunctions and excitotoxicity in bilateral common carotid artery occluded mice. Behav Pharmacol. 2016 Oct;27(7):615-22.