Citas (Citations)
4 publicationsPublicaciones de investigadores que utilizan este productoDescripción (Description)
TRFS-green es una sonda fluorescente verde de encendido, muy selectiva para la tioredoxina reductasa (TrxR). Se emplea mucho para visualizar la actividad de la TrxR en células vivas. En condiciones fisiológicas simuladas, sus pares Ex/Em son 377nm/480nm y 438nm/538nm[1]. TrxR suele estar sobreexpresada en multitud de células tumoreales. Si se suprime esta enzima, se consigue frenar el crecimeinto de distintos tumores malignos. Esto confirma que esta selenoenzima constituye una diana válida para crear nuevos fármacos anticancerosos[2,3,4]. TRFS-green ayuda a hallar pequeñas moléculas dirigidas contra la TrxR. Además, profundiza el conocimeinto sobre las funciones fisiológicas y patológicas de esta enzima en organismos vivos[1,5].
Protocolo (Protocol)
Almacenamiento de TRFS-green:
(1) Centrifuga TRFS-green a temperatura ambiente hasta llegar a la parte inferior del tubo.
(2) Disolver en DMSO a una concentración final de 10mM, leugo alícuota y congelar para evitar ciclos repetidos de congelación-descongelación.
Usando TRFS-green para imágenes de células vivas[1]:
(1) Las células Hep G2 se sembraron en una placa de 12 pozos y se cultivaron en DMEM suplementado con 10% de FBS, 2mM de glutamine, penicillin (100units/mL), streptomycin (100units/mL) a 37℃ en una atmósfera humidificada de 5% de CO2 durante la noche.
(2) Se añadió TRFS-green (10μM) y las células se incubaron durante 2-4h.
(3) Las células se enjuagaron con el medio durante tres veces para eliminar el TRFS-green restante.
(4) Las imágenes de fluorescencia fueron adquiridas por un microscopio fluorescente, la cuantificación de la intensidad de la fluorescencia celular se realizó mediante un lector de microplacas fluorescente (Ex/Em: 438nm/538nm).
Documentos del producto (Product Documents)
Propiedades químicas (Chemical Properties)
Utilice las soluciones madre en un plazo de 6 meses si se conservan a -80°C, o de 1 mes si se conservan a -20°C.
Para mejorar la solubilidad, caliente el tubo a 37°C y soníquelo durante un periodo adecuado.
Calculadoras (Calculators)Molaridad / Dilución / Peso molecular / Conversión de unidades / Formulación in vivo / Solubilidad
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