EMD-1214063

Zelllinien

Triple-negative Brustkrebs-Zelllinien (MDA-MB-468, HCC-1395, und MDA-MB-231) und Hormonreceptor-positive Zelllinie (T47D)

Vorbereitungsmethode

Die Zellen wurden in 96-Well-Mikroplatten in einem mit 5% FBS und Penicillin/Streptomycin ergänzten Medium ausgesät. Die optimale Zellzahl für jede Zelllinie wurde ermittelt, um sicherzustellen, dass sich alle Zellen am Ende des Tests in der Wachstumsphase befanden(~70% Konfluenz). Die Zellen wurden 24 Stunden lang angeheftet. Das Medium wurde auf einen niedrigen FBS (2%) umgestellt, und die Medikamente in verschiedenen Kombinationen wurden zugegeben (Cetuximab 200ug/mL, Gefitinib 0,25-8 umol/L und EMD-1214063 2-10 μM).Die Zellen wurden 72 Stunden lang bei 37°C inkubiert.

Reaktionsbedingungen

2-10 µM für 72 Stunden

Anwendungen

Diese Zelllinien waren im Wesentlichen sowohl gegen Gefitinib als auch EMD-1214063 als Einzelwirkstoffe resistent. Die hemmende Wirkung der kombinierten Behandlung mit Gefitinib und EMD-1214063 war bei MDA-MB-468-Zellen im Vergleich zur Einzeltherapie signifikant verstärkt, nicht aber bei den anderen Zelllinien (MDA-MB-231, HCC1395, und T47D).

Tiermodelle

BALB/c nude male mice

Vorbereitungsmethode

Die vom Patienten stammenden hepatozellulären Karzinomzellen (HCC) wurden in männliche BALB/c-Nacktmäuse subkutan inokuliert. Wenn die Tumore einen Durchmesser von etwa 1cm erreicht hatten, wurden die subkutanen Tumore entnommen, in Stücke von etwa 2-3 mm3 geschnitten und in den linken Leberlappen von männlichen BALB/c-Nacktmäusen injiziert. Die Mäuse wurden oral fünf Tage lang mit einer Kombination aus Vehikel (n = 10; 20% Solutol/80% 100 mM Na-Acetat-Puffer, pH 5.5 ), EMD-1214063 (n = 10; 10, 30, or 100 mg/kg), Sorafenib (n = 10; 50 mg/kg), oder Rapamycin (n = 10; 3 mg/kg) als Einzelwirkstoff behandelt. Darüber hinaus wurde EMD-1214063 (10 mg/kg) als Kombinationsbehandlung mit Sorafenib (n = 10, 50 mg/kg) oder Rapamycin (n = 10; 3 mg/kg) verabreicht. Die Behandlung wurde sieben Tage lang nach der orthotopen Implantation von Tumorfragmenten begonnen und nach fünf Wochen beendet.

Dosierungsform

10, 30, oder 100 mg/kg/d, fünf Tage an/ zwei Tage aus, oral

Anwendungen

Die Größe und das Gewicht des intrahepatischen Tumors waren bei den mit EMD-1214063 behandelten Mäusen im Vergleich zur Kontrollgruppe deutlich geringer. Die Behandlung mit EMD-1214063 reduzierte die Anzahl der Metastasenherde in der Lunge von Mäusen, die orthotopische MHCC97H Tumor trugen, im Vergleich zur Kontrollgruppe.

References:
[1] : Sohn J, Liu S, Parinyanitikul N, et al. cMET activation and EGFR-directed therapy resistance in triple-negative breast cancer[J]. Journal of Cancer, 2014, 5(9): 745.
[2] :Bladt F, Friese-Hamim M, Ihling C, et al. The c-Met inhibitor MSC2156119J effectively inhibits tumor growth in liver cancer models[J]. Cancers, 2014, 6(3): 1736-1752.