MTSEA[(2-aminoethyl) methanethiosulfonate] ist ein Cystein-modifizierendes Reagenz[1]. Die Sulfhydryl-Seitenkette(-SH) des Cysteins kann eine kovalente Disulfidbrücke mit dem Schwefel im MTSEA-Reagenz bilden[2].
Mithilfe von MTSEA konnte das Bestehen eines wasserzugänglichen Cysteins in der Bindungsstelle des humanen Dopamin-D2-Rezeptors nachgewiesen werden[3]. Die Rotationsbewegung von TM6 durch MTSEA (bei Rezeptoraktivierung) wurde durch das Auftreten eines MTSEA-zugänglichen Cysteins in einer konstitutiv aktiven Mutante des β2-adrenergen Rezeptors nachgewiesen, das im Wildtyp-Rezeptor nicht zugänglich ist[4]. Der Effekt von MTSEA auf die Ligandenbindung wurde in Kombination mit gezielter Mutagenese genutzt, um intramolekulare Kontakte im Neurokinin-2-Tachykinin-Rezeptor zu definieren[5].
References:
[1]. Choi YB, Tenneti L, Le DA, Ortiz J, Bai G, Chen HS, Lipton SA. Molecular basis of NMDA receptor-coupled ion channel modulation by S-nitrosylation. Nature neuroscience. 2000 Jan;3(1):15-21.
[2]. O'Reilly JP, Shockett PE. Time-and state-dependent effects of methanethiosulfonate ethylammonium (MTSEA) exposure differ between heart and skeletal muscle voltage-gated Na+ channels. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranes. 2012 Mar 1;1818(3):443-7.
[3]. Javitch JA, Li X, Kaback J, Karlin A. A cysteine residue in the third membrane-spanning segment of the human D2 dopamine receptor is exposed in the binding-site crevice. Proceedings of the National Academy of Sciences. 1994 Oct 25;91(22):10355-9.
[4]. Rasmussen SG, Jensen AD, Liapakis G, Ghanouni P, Javitch JA, Gether U. Mutation of a highly conserved aspartic acid in the β2 adrenergic receptor: constitutive activation, structural instability, and conformational rearrangement of transmembrane segment 6. Molecular pharmacology. 1999 Jul 1;56(1):175-84.
[5]. Bhogal N, Blaney FE, Ingley PM, Rees J, Findlay JB. Evidence for the proximity of the extreme N-terminus of the neurokinin-2 (NK2) tachykinin receptor to cys167 in the putative fourth transmembrane helix. Biochemistry. 2004 Mar 23;43(11):3027-38.