2×Taq PCR Master Mix(with blue dye) est une solution prête à l’emploi, rapide et simple, prémélangée pour PCR, qui contient un tampon de charge bleu. Cette formulation prémélangée gagne du temps et réduit la contamination en raison du nombre réduit d’étapes de pipettage nécessaire pour mettre en place PCR.
Le mélange réactionnel n’a besoin d’ajouter que des amorces, une matrice et de l’eau distillée déionisée ( ddH2O). 2×Taq PCR Master Mix(with blue dye) contient déjà un tampon de charge bleu, ce qui permet de sauter l’étape de mélange du tampon de charge et peut indiquer la progression de l’électrophorèse après la réaction de PCR. La vitesse de migration du colorant bleu dans un gel d’agarose à 1% TAE est similaire à celle d’un fragment de DNA double-brin de 500pb.
La polymérase de DNA Taq ne possède aucune activité exonucléase 3'→5' et génère dess produits de PCR avec des sursauts 3’-dA, qui peuvent être utilisés directement pour le clonage dans un vecteur TA après purification. Il est recommandé d’utiliser 2×Taq PCR Master Mix(with blue dye) (numéro de catalogue : GK10036) lorsque le contenu en GC du fragment cible est élevé (>60%) ou que le fragment cible est trop long.
2×Taq PCR Master Mix(with blue dye) peut être utilisé pour les expériences de PCR semi-quantitative à grande échelle, pour la détection de traces de DNA après amplification par PCR, ainsi que pour amplifier les produits de PCR à partir de matrices complexes telles que des génomes, par exemple pour le clonage de gènes exprimés, l’analyse des mutations ponctuelles du gène (SNP) et les mutations ciblées du gène.