Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate |
Catalog No.GC37965
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Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate est un substrat fluorescent spécifique de la thrombine, avec λexc = 355nm, λem = 460nm.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 2070009-61-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate est un substrat fluorescent spécifique de la thrombine, avec λexc = 355nm, λem = 460nm[1]. Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate sert de substrat de référence dans le thrombograme automatisé calibré (CAT), utilisé pour mesurer le potentiel thrombinique endogène (ETP) dans le plasma riche en plaquettes (PRP) ou le plasma pauvre en plaquettes (PPP)[2]. Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate est employé en format de plaques de 96 puits pour l'identification rapide et le classement de la puissance des inhibiteurs directs de la thrombine ou des antagonistes des récepteurs activés par les protéases[3].
References:
[1] Tarandovskiy I D, Artemenko E O, Panteleev M A, et al. Antiplatelet agents can promote two-peaked thrombin generation in platelet rich plasma: mechanism and possible applications[J]. PLoS One, 2013, 8(2): e55688.
[2] Machlus K R, Colby E A, Wu J R, et al. Effects of tissue factor, thrombomodulin and elevated clotting factor levels on thrombin generation in the calibrated automated thrombogram[J]. Thrombosis and haemostasis, 2009, 102(11): 936-944.
[3] Kale S S, Bergeron-Brlek M, Wu Y, et al. Thiol-to-amine cyclization reaction enables screening of large libraries of macrocyclic compounds and the generation of sub-kilodalton ligands[J]. Science advances, 2019, 5(8): eaaw2851.
Détection de l'activité thrombinique basée sur Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate[1]
Ce protocole fournit seulement une lignée directrice; il doit être adapté selon vos besoins spécifiques.
1.Préparation des solutions
(1)Dissoudre le solide de Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate dans une quantité appropriée de DMSO pour préparer une solution de stock à 50mM. Conserver la solution de stock à -20°C et éviter les cycles répétés de congélation/décongélation.
(2)Diluer la solution de stock de Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate dans PBS pour préparer une solution de travail à 2,5mM. La solution de travail doit être préparée immédiatement et utilisée rapidement.
(3)Prendre une solution de CaCl2 appropriée et la dissoudre dans le tampon de détection (contenant 20mM HEPES, 145mM NaCl, pH 7.5) pour préparer le tampon d'activation.
2.Test de génération de thrombine
(1)Mélanger le plasma avec la solution de stock de Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate dans un rapport volumique de 4:1, puis placer le mélange dans les puits d'une plaque de 96 puits à fond plat. Ajouter 100µl du mélange dans chaque puits. Ajouter 20µl de tampon d'activation dans chaque puits pour déclencher la réaction de coagulation. La concentration finale de Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate est 400µM.
(2)Mesuer la fluorescence en continu à 37°C à l'aide d'un lecteur de plaque fluorescent (Ex/Em=355/460nm) pendant 30 minutes, avec une lecture toutes les 3 minutes.
3.Consignes d'attention
(1)Z-Gly-Gly-Arg-AMC acetate est photosensible; le processus opératoire doit être réalisé à l'abri de la lumière.
(2)Pour éviter les bulles, la lecture doit être effectuée dans les 10 secondes suivant l'ajout du tampon d'activation (contenant CaCl₂).
References:
[1] Tarandovskiy I D, Artemenko E O, Panteleev M A, et al. Antiplatelet agents can promote two-peaked thrombin generation in platelet rich plasma: mechanism and possible applications[J]. PLoS One, 2013, 8(2): e55688.
| Cas No. | 2070009-61-7 | SDF | |
| Formula | C30H37N7O9 | M.Wt | 639.66 |
| Solubility | Water : ≥ 60 mg/mL (93.80 mM) | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5633 mL | 7.8167 mL | 15.6333 mL |
| 5 mM | 312.7 μL | 1.5633 mL | 3.1267 mL |
| 10 mM | 156.3 μL | 781.7 μL | 1.5633 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.50% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 37 reference(s) in Google Scholar.)