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Ionomycin calcium salt est un antibiotique à spectre étroit actif contre les bactéries Gram-positives, produit par la bactérie Streptomyces conglobatus[1]. Ionomycin calcium salt favorise l'apoptose. L'ionomycine induit également l'activation de la protéine kinase C (PKC)[2].
In vitro, le traitement des cellules LCLC 103H par 2 µM d'Ionomycine entraîne une augmentation instantanée de la concentration intracellulaire de Ca2+ de 50 à 180 nM. Dans les cultures traitées à l'Ionomycine, on observe une fragmentation évidente de l'ADN et un clivage de la PARP en un fragment de 85 kDa, et une nécrose peut être détectée dans ~1-5% des cellules traitées à l'Ionomycine[2]. Dans les cellules exprimant l'oncogène ras, l'ionomycine entraîne une augmentation dose-dépendante de l'activité calcique intracellulaire. À 100 nmol/l d'ionomycine, le calcium intracellulaire passe de 114 ± 17 nmol/l à 342 ± 24 nmol/l, une valeur qui se situe dans la fourchette des concentrations de calcium intracellulaire après l'application de bradykinine[3].
Lors d'un test d'efficacité in vivo, après traitement avec 1 µm d'ionomycine pendant 6 heures, l'ubiquitination de ENaC-β a été fortement renforcée dans les cellules surexprimant Nedd4-2a de type sauvage[4].
References:
[1] Liu WC, et al. Ionomycin, a new polyether antibiotic. J Antibiot (Tokyo). 1978 Sep;31(9):815-9.
[2] Chatila T, et al. Mechanisms of T cell activation by the calcium ionophore ionomycin. J Immunol. 1989 Aug 15;143(4):1283-9.
[3] WÖll E, et al. The role of calcium in cell shrinkage and intracellular alkalinization by bradykinin in Ha-ras oncogene expressing cells. FEBS Lett. 1993 May 17;322(3):261-5.
[4] Wang J, et al. Calcium activates Nedd4 E3 ubiquitin ligases by releasing the C2 domain-mediated auto-inhibition. J Biol Chem. 2010 Apr 16;285(16):12279-88.
Protocole (Protocol)
| Expériences cellulaires [1]: | |
Lignées cellulaires | Cellules N1E-115 |
Méthode de préparation | Les cellules ont été traitées avec différentes concentrations (0, 0,2, 0,5, 1, 2 et 10 µM) et durées d'incubation (3, 6, 12 et 24 h) d'ionomycine, et la survie cellulaire a été déterminée à l'aide du test d'exclusion du colorant bleu trypan. |
Conditions de réaction | 0, 0,2, 0,5, 1, 2 et 10 µM;3, 6, 12 et 24 h |
Domaines d'application | Le traitement à Iionomycine a induit la mort cellulaire de manière dépendante de la concentration et du temps. |
| Expériences animales [2]: | |
Modèles animaux | Souris adultes mâles C57BL/6 de type sauvage (20-25 g, 8-10 semaines) et souris FXR KO (20-25 g, 8-10 semaines). |
Méthode de préparation | Afin d'étudier la fonction biologique de FXR in vivo, un agoniste des canaux calciques de type L, le Bayk8644 (2 mg/kg), a été administré par voie intrapéritonéale 10 minutes après la reperfusion. La solution mère de Bayk8644 (1 mmol/L dans du diméthylsulfoxyde, DMSO) a été diluée dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) 1× avec une concentration finale de DMSO de 4,6 %. De même, du PBS avec 4,6 % de DMSO a été administré par voie intrapéritonéale dans les groupes sham, véhicule de type sauvage et véhicule FXR knockout, à titre de contrôle. Une gamme de doses d'ionomycine (50 nmol/L), de GW4064 (0, 1, 1,5, 3 et 6 µmol/L) ou de Z-guggulsterone (Z-GS, 0, 2,5, 5 et 10 µmol/L) a été administrée pendant 18 heures avant la privation d'oxygène et de glucose (OGD). |
Forme de dosage | 50 nmol/L (4.6% DMSO); 18 h; i.p. |
Domaines d'application | La coloration TUNEL a démontré que le traitement par Z-GS réduisait l'apoptose neuronale et que l'ajout d'IM (Ionomycine) augmentait significativement les neurones apoptotiques par rapport au groupe OGD, ce qui suggère que l'inhibition du FXR (Farnesoid X receptor) peut réduire l'apoptose neuronale en réduisant l'influx calcique après OGD/R. |
Références : | |
Documents produit (Product Documents)
Propriétés chimiques (Chemical Properties)
Utilisez les solutions mères dans les 6 mois si elles sont conservées à -80°C, ou dans le mois si elles sont conservées à -20°C.
Pour améliorer la solubilité, réchauffez le tube à 37°C et soniquez-le pendant une durée appropriée.
Calculateurs (Calculators)Molarité / Dilution / Masse moléculaire / Conversion d’unités / Formulation in vivo / Solubilité
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