L-Glutamic acid

Lignées cellulaires

Méthode de préparation

Pour clarifier l'effet des hautes concentrations de L-Glutamic acid sur le processus de fusion des cellules C2C12, des cellules C2C12, des cellules C2C12 qui avaient été différenciées pendant 3 jours en présence de 0-5mM de L-Glutamic acid ont été marquées par immunofluorescence avec un anticorps anti-myosine musculaire squelettique. Le phénotype cellulaire et le nombre de noyaux ont été analysés pour évaluer la fusion des myocytes. Les cellules positives pour la chaîne lourde de la myosine (MHC) avec trois noyaux ou plus ont été définies comme des cellules fusionnées. Pour déterminer si les hautes concentrations de L-Glutamic acid affectent directement le processus de fusion des cellules C2C12, des cellules qui avaient été différenciées pendant 3 jours (lorsque le niveau d'expression de MHC à contraction rapide atteint un plateau) ont été stimulées avec L-Glutamic acid à 5mM pendant 2 jours.

Les cellules C2C12 ont été différenciées pendant 2 jours en présence de L-Glutamic acid (0, 0.3, 1 ou 5mM), suivie d'une analyse de l'expression de mGluR5 et NMDAR dans la membrane plasmique et dans les cellules entières par immunbuvardage (Western Blot). La N-cadhérine ou GAPDH ont été utilisés en tant que standard interne. Après que les cellules C2C12 aient été différenciées pendant 3 jours, elles ont été différenciées davantage pendant 2 jours en présence de L-Glutamic acid (0, 0.3, 1 ou 5mM). L'expression de mGluR5 et NMDAR dans les cellules entières a été analysée par immunobuvardage.

Conditions de réaction

Domaines d'application

Modèles animaux

Méthode de préparation

Les animaux ont été divisés en quatre groupes, chacun comprenant 22 rats, respectivement le groupe opéré de manière simulée (SO), le groupe d'ischémie-reperfusion (IR), le groupe traité par L-Glutamic acid (L-GA) à 400μM/kg et le groupe traité par mémantine (MN) à 20mg/kg. Des tests ont été réalisés à différentes intervalles de temps après l'ischémie-reperfusion (0, 24, 48 et 72h). L-Glutamic acid (par voie intraveineuse) et MN (par voie intra-péritonéale) ont été administrés 30 minutes avant la chirurgie. Les rats SO et IR ont reçu la saline (par voie intra-péritonéale). Les traitements médicamenteux ont été poursuivis toutes les 24 heures après IR jusqu'à la fin de l'étude.

Les mesures comportementales (à 24, 48 et 72h après IR) et du flux sanguin cérébral (à 0, 24, 48 et 72h après IR) ont été effectuées 30 minutes après l'administration du médicament ou du véhicule le matin. Après le test comportemental, les mesures de flux sanguin cérébral (CBF) ont été réalisées sous anesthésie légère à l'éther. Après la mesure de CBF, les rats ont été euthanasiés. L'euthanasie a été effectuée dans une chambre anesthésique en utilisant de la laine de coton imprégnée d'éther pour induire une dépression respiratoire. Par la suite, le cerveau a été disséqué du crâne. Le cerveau a été ensuite microdisséqué pour isoler le cortex, le striatum et l'hippocampe afin d'estimer les neurotransmetteurs et les neurobiochimiques.

Forme de dosage

Domaines d'application

References:
[1] Ban H, Nobe K, Kobayashi S. Inhibitory effects of high extracellular L-glutamate concentrations on skeletal myogenesis. Sci Rep. 2025 May 19;15(1):17364.
[2] Ramanathan M, Abdul KK, Justin A. Low dose of L-glutamic acid attenuated the neurological dysfunctions and excitotoxicity in bilateral common carotid artery occluded mice. Behav Pharmacol. 2016 Oct;27(7):615-22.