FCCP (Synonyms: Trifluoromethoxy carbonylcyanide phenylhydrazone) |
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Catalog No.GC14328
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FCCP는 매우 친지질성인 미토콘드리아 언커플러이다.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 370-86-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
FCCP는 매우 친지질성인 미토콘드리아 언커플러이다. FCCP는 미토콘드리아 내막에서 양성자 운반체로 작용해서 양성자를 수송하고 미토콘드리아 막 전위와 pH 구배를 소산시켜서 전자 전달과 ATP 합성을 결합한다. 게다가 ATP 생성을 억제해서 산소 소비를 증가시키고 미토콘드리아 ATP 합성을 감소시켜 에너지 스트레스를 유발해서 AMPK 및 기타 에너지 감지 노드고 HIF 신호 전달에도 영향을 미친다. FCCP는 미토콘드리아 기능, 세포 에너지 대사, 저산소증 신호 전달 및 종양 대사 연구에 사용될 수 있다[1-4].
체외 실험에서 HuH6, Hep3B, HepG2 및 HLE 세포를 1μM의 FCCP와 젬시타빈으로 16-48시간 동안 공동 처리하한 후 젬시타빈에 의해 유도된 미토콘드리아 슈퍼옥사이드 생성이 억제되고 젬시타빈에 의한 세포 성장 억제에 대한 내성이 유도되었다[5]. 니클로사마이드로 전처리한 HEK293T 세포를 10μM의 FCCP로 1시간 처리하면 최대 세포 호흡률이 감소하였다[6]. 4T1 또는 B16 세포를 0.5μM의 FCCP로 30분 처리한 후 탈커플링된 산소 소비율이 최고치에 도달하였다[7].
체내 실험에서 C57BL/6 쥐와 PINK1 결핍 (PINK1-/-) 쥐에게 1일 동안 1mg/kg의 FCCP를 하루 두 번 복강 주사한 후 파킨이 심장 미토콘드리아로 전위되었고 이는 미토콘드리아 단백질의 유비퀴틴화 증가 및 자식 단백질인 LC3II의 미토콘드리아 결합 증가를 동반하였다. 야생형 및 PINK1-/- 쥐의 심장에 100nM의 FCCP를 5-15분 동안 후퇴성 대동맥 퍼퓨전을 시행하고 내인성 PINK1의 미토콘드리아 축적 없이 파킨이 심장 미토콘드리아 분획에 빠르게 축적되었다[8].
| 세포 실험 [1]: | |
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세포주 |
HuH6,Hep3B, HepG2, HLE 세포 (인간 간세포암 세포 라인) |
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준비 방법 |
HuH6, Hep3B, HepG2 및 HLE 세포는 10% FBS가 보충된 Dulbecco's Modified Eagle Medium에서 37°C, 5% CO₂ 조건 하에서 배양하였습니다. 세포를 96-웰 판에 파종하고 1μM의 젬시타빈 단독 또는 FCCP (4-trifluoro-methoxy-phenyl-hydrazone)와 병용해서 16시간 (미토콘드리아 슈퍼옥사이드 분석) 또는 48시간 (세포 성장 억제 분석) 동안 처리하였습니다. 처리한 후 MitoSox Red (Catalog No. GC68230)를 사용해서 미토콘드리아 슈퍼옥사이드를 측정해서 MTT (Catalog No. GC14731) 분석을 통해 세포 성장을 측정하였습니다. |
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반응 조건 |
1μM; 16 시간 또는 48 시간 동안 |
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적용 |
FCCP와 젬시타빈의 공동 처리는 HuH6, Hep3B, HepG2 및 HLE 세포에서 젬시타빈에 의해 유도된 세포 성장 억제에 대한 내성을 유도하였습니다. 게다가 FCCP와 젬시타빈의 공동 처리는 HuH6, Hep3B, HepG2 및 HLE 세포에서 젬시타빈에 의해 유도된 미토콘드리아 슈퍼옥사이드 생성을 방지하였습니다. |
| 동물 실험 [2]: | |
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동물 모델 |
양생형 C57BL/6 쥐, PINK1-결핍 (PINK1-/-) 쥐 |
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준비 방법 |
쥐에게 생리식염수에 녹인 1mg/kg의 FCCP를 하루 두 번 복강 주사하였습니다. 마지막 투여는 조직 채취 1시간 전에 실시하였습니다. 심장을 적출해서 Krebs-Henseleit 완충액으로 대동맥 역행 관류를 5분 동안 평형화한 후 100nM의 FCCP가 포함된 관류액으로 5분 또는 15분 동안 관류하였습니다. 심실 조직을 사용하여 미토콘드리아를 분리해서 Parkin, PINK1, 유비퀴틴, LC3II, Tom20, 복합체 마커 및 GAPDH에 대해 단백질 자극법을 수행하였습니다. |
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제형 |
1mg/kg; i.p.; 1일 동안 매일 2번 100nM; 심장 퍼퓨전, 5분 또는 15분 동안 |
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적용 |
FCCP 투여는 야생형 및 PINK1-/- 심장의 미토콘드리아 분획에서 파킨 수치를 증가시켰습니다. FCCP 퍼퓨전은 5분 또는 15분 시점에 야생형 심장의 미토콘드리아에 내인성 PINK1을 축적시키지 않았습니다. 체내 FCCP 투여는 야생형 및 PINK1-/- 심장의 미토콘드리아로의 파킨 전위를 증가시켰고 미토콘드리아 단백질의 유비퀴틴화를 증가시켜서 야생형 및 PINK1-/- 심장에서 LC3II와 미토콘드리아의 결합을 증가시켰습니다. |
| Cas No. | 370-86-5 | SDF | |
| Synonyms | Trifluoromethoxy carbonylcyanide phenylhydrazone | ||
| Chemical Name | (4-(trifluoromethoxy)phenyl)carbonohydrazonoyl dicyanide | ||
| Canonical SMILES | FC(F)(OC1=CC=C(C=C1)N/N=C(C#N)/C#N)F | ||
| Formula | C10H5F3N4O | M.Wt | 254.17 |
| Solubility | ≥ 56.6 mg/mL in DMSO with ultrasonic, ≥ 25 mg/mL in EtOH with ultrasonic | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.9344 mL | 19.6719 mL | 39.3437 mL |
| 5 mM | 786.9 μL | 3.9344 mL | 7.8687 mL |
| 10 mM | 393.4 μL | 1.9672 mL | 3.9344 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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