Isosulfan blue

이 프로토콜은 유방암 수술에서 Isosulfan blue 염료를 사용해서 전이된 림프절을 지도화하는 방법을 설명합니다. 실제 적용 조건은 암 유형과 연구 설계 의존적으로 최적화할 필요가 있을 수 있습니다 [1-2].

1. 시약 및 재료의 준비

무균 생리식염수 (0.9% NaCl) 중 1% (w/v) Isosulfan blue 용액, 무균 1mL 주사기 (27-30G 바늘), 마취제, 종양을 가진 쥐 (BALB/c 쥐의 4T1 유방암 모델)

2.실험 절차

(1) 마취 및 위치 지정

이소플루란 또는 케타민/자일라진을 사용해서 쥐를 마취합니다. 쥐를 등자세로 놓고 사지를 고정합니다.

(2) 염료 주입

Isosulfan blue 20–50µL을 주사기에 넣습니다. 종양 부위 근처 피하에 주입하고 유방암 모델링할 때 종양 주변이나 유륜 주변에 주입합니다. 주입 부위: 유방 지방 패드입니다. 주입 부위를 3-5분간 살살 마사지해서 임파선 흡수를 증진시킵니다.

(3) 염료 이동 및 해부

림프 유출을 위해 10-15분간 기다립니다. 종양 위치와 예상되는 유출 패턴 의존적으로 대퇴부 또는 겨드랑이 부위에 절개를 합니다. 파란색 염색된 림프관을 식별하고 파란색 전이 림프절을 찾습니다. 림프절을 절제해서 조직학적 또는 분자 분석을 위해 수집합니다.

주의사항 및 주의사항

(1) 주입량은 조직 부종과 비특이적 확산을 방지하기 위해 작아야 합니다.

(2) 감염을 피하기 위해 무균 기술을 사용해야 합니다.

(3) 혈관 내 주사를 피하고 천천히 제어된 피하 주사를 실시해야 합니다.

(4) Isosulfan blue는 드물게 과민 반응을 일으킬 수 있고 동물을 자세히 관찰해야 합니다. (5) 조직학적 비교를 위해 적절한 대조 그룹 (염료를 주사하지 않은 쥐)을 사용해야 합니다.

References:
[1]. Hirsch JI, Tisnado J, Cho SR, et al. isosulfan blue for identification of lymphatic vessels: experimental and clinical evaluation. American Journal of Roentgenology. 1982 Dec 1; 39(6): 061-1064.
[2]. Montgomery LL, Thorne AC, Van Zee KJ, et al. Isosulfan blue dye reactions during sentinel lymph node mapping for breast cancer. Anesthesia & Analgesia. 2002 Aug 1; 95(2): 385-388.