OD 36 hydrochloride

세포주

준비 방법

ATDC5 세포는 폴리브레인 (4 mg/ml) 존재 하에서 ALK2wt‐HA 또는 ALK2R206H‐HA를 각각 발현하는 동일 티터의 아데노바이러스 입자로 형질도입하였습니다. ATDC5 세포를 트립신 처리한 후 PBS로 한 번 세척하였습니다. 마이크로매스당 3×10⁵ 개의 세포를 계수해서 10 μl 배양지에 재소생시켰습니다. 100 μl 액적을 24-웰 판의 각 웰 중앙에 주의해서 떨어뜨린 후 배양기에서 2시간 동안 배양하였습니다. 이후 1× ITS와 5% 태아 소 혈청 (FBS)이 포함된 500 μl DMEM‐F12 배양지를 각 웰에 주의해서 첨가하였습니다. 24시간 후 배양지를 1× ITS와 5% FBS가 포함된 DMEM‐F12 배양지로 교체해서 액티빈 A(100 ng/ml) 및 DMSO, LDN‐193189, OD 36 hydrochloride 또는 OD52 (0.5 μM)를 첨가하였습니다. 세포는 추가 분석 전까지 21일간 배양하였고 이 기간 동안 5일마다 배양지를 교체하였습니다. 마지막으로 세포를 세척한 후 10배 증대율의 현미경으로 이미지를 촬영하였습니다.

반응 조건

적용

OD 36 hydrochloride 처리는 돌연변이 R206H ALK2를 발현하는 ATDC5 세포에서 액티빈 A가 유도한 조골 및 연골 분화를 현저하게 억제하였습니다.

동물 모델

준비 방법

C57BL/6 쥐는 에어컨이 설치된 사육실에서 12시간 빛/어둠 주기로 사육되었고 표준 실험용 쥐 사료와 수돗물을 공급받았습니다. 쥐는 새로운 환경에 적응할 수 있도록 7일간 허용되었습니다. C57BL/6 쥐에는 대조 용매 또는 6.25 mg/kg의 게피티닙 혹은 OD 36 hydrochloride를 500 μl 부피로 복강 내 주사하였습니다. 30분 후 쥐에 150 μg의 MDP를 복강 내 주사하였습니다. 4시간 후 쥐를 안락사시키고 5 ml의 PBS를 사용해서 복강 세척을 수행하였습니다.

제형

6.25mg/kg 한 번; i.p.

적용

OD 36 hydrochloride 처리는 머라밀 디펩타이드 (MDP) 유도 쥐 복막염 모델에서 세포 침윤을 감소시켰습니다.