PPACK (Synonyms: Pebac, D-Phenylalanyl-prolyl-arginyl Chloromethyl Ketone) |
Catalog No.GC44671
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PPACK은 강력한 선택성이 있고 불가역적인 혈전효소 억제제로서 인간 α혈전효소를 0.24 nM의 Ki 값으로 억제한다.
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Cas No.: 71142-71-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
PPACK은 강력한 선택성이 있고 불가역적인 혈전효소 억제제로서 인간 α혈전효소를 0.24 nM의 Ki 값으로 억제한다. PPACK은 rt-PA가 혈장 단백아효소 억제제와 결합하는 것을 유기체에서 억제한다[1-3]. 이것은 혈전효소 활성 부위의 세르린과 공유 결합을 형성하고 His57과 교차 링크를 형성하여 사각형 PPACK-혈전효소 복합체를 만든다. PPACK은 섬유소단물질, 혈소판 생성 및 α2-항혈소판 변화를 완전히 억제한다[4-6].
PPACK(0.2 mM; 2시간)과의 공배양은 쇠동맥 내피세포에서 플라스민이 유도한 내피허용도 증가를 59% 감소시켰다[7]. 헴산산화효소(HO)-1은 헴 분해에서 속도를 제한하는 역할을 하는 스트레스 유도 효소로, 산화적 손상에 대한 세포 보호를 제공한다. PPACK(24시간; 30 nM)으로 세포를 사전 처리하면 혈전효소가 HO-1 표현을 강화하는 효과를 효과적으로 억제한다[8].
PPACK(일시 투여량 10-100 μg/kg 또는 0.25-1.0 μg/kg/분의 연속 주사) 사전처리는 토끼에서 혈전효소가 유도한 뇌 혈전 혈전증을 억제할 수 있다[9].
References:
[1]. Mohler MA, Refino CJ, et,al. D-Phe-Pro-Arg-chloromethylketone: its potential use in inhibiting the formation of in vitro artifacts in blood collected during tissue-type plasminogen activator thrombolytic therapy. Thromb Haemost. 1986 Oct 21;56(2):160-4. PMID: 2433785.
[2]. Bode W, Mayr I, et,al. The refined 1.9 A crystal structure of human alpha-thrombin: interaction with D-Phe-Pro-Arg chloromethylketone and significance of the Tyr-Pro-Pro-Trp insertion segment. EMBO J. 1989 Nov;8(11):3467-75. doi: 10.1002/j.1460-2075.1989.tb08511.x. PMID: 2583108; PMCID: PMC401503.
[3]. Lyon ME, Fine JS, et,al. D-phenylalanyl-L-prolyl-L-arginine chloromethyl ketone (PPACK): alternative anticoagulant to heparin salts for blood gas and electrolyte specimens. Clin Chem. 1995 Jul;41(7):1038-41. PMID: 7600685.
[4]. Kovach IM, Kelley P, et,al. Proton bridging in the interactions of thrombin with small inhibitors. Biochemistry. 2009 Aug 4;48(30):7296-304. doi: 10.1021/bi900098s. PMID: 19530705; PMCID: PMC2800789.
[5]. Kettner C, Shaw E. D-Phe-Pro-ArgCH2C1-A selective affinity label for thrombin. Thromb Res. 1979;14(6):969-73. doi: 10.1016/0049-3848(79)90014-8. PMID: 473131.
[6]. Nienaber VL, Mersinger LJ, et,al. Structure-based understanding of ligand affinity using human thrombin as a model system. Biochemistry. 1996 Jul 30;35(30):9690-9. doi: 10.1021/bi952164b. PMID: 8703940.
[7]. Rabbani LE, Johnstone MT, et,al. PPACK attenuates plasmin-induced changes in endothelial integrity. Thromb Res. 1993 Jun 15;70(6):425-36. doi: 10.1016/0049-3848(93)90085-3. PMID: 8362368.
[8].Liu JF, Hou SM, et,al. Thrombin induces heme oxygenase-1 expression in human synovial fibroblasts through protease-activated receptor signaling pathways. Arthritis Res Ther. 2012 Apr 27;14(2):R91. doi: 10.1186/ar3815. PMID: 22541814; PMCID: PMC3446465.
[9]. Liu JT, Paul W, et,al. Thrombin inhibitors and anti-coagulants on thrombin-induced embolisation in rabbit cranial vasculature. Eur J Pharmacol. 1994 Oct 24;264(2):183-90. doi: 10.1016/0014-2999(94)00464-1. PMID: 7851481.
| 동역학 절차 (PPACK을 사용한 혈전효소 억제) [1]： | |
| 제조 방법 | 혈전효소 보관 용액은 적절한 버퍼에 희석되어 20 mL, 농도가 3-5×10-10 M의 용액을 얻었습니다. 980 μL의 용액을 분광광도계의 온도 제어 셀 부분에서 냉각 균형에 도달하기 위해 빔에 녹색되었습니다. 10 μL의 열 균형 1.1×10-7에서 3.65×10-7 M PPACK 용액을 주입하고 혼합하여 혈전효소 억제를 시작했습니다. 반응 혼합물은 15에서 200초 사이의 시간 간격 동안 즉시 녹색되었으며, 그런 다음 3-5×1 10-3 M의 DMSO에 희석된 .배양기 용액 10 μL을 빠르게 추가하여 남은 효소 활동을 측정했습니다. 억제 시간에 대한 10회 연속 숙화 시간의 남은 효소 활동에 지수 함수를 적합시켜 의사 제1 질서 속도 상수를 계산했습니다. 288-308 K의 온도 범위에서 혈전효소 활동은 실험 기간 동안 일정하게 유지되었습니다. |
| 응용 분야 | PPACK은 강력한 선택성이 있고 불가역적인 혈전효소 억제제로 인간 α혈전효소를 0.24 nM의 Ki 값으로 억제합니다. |
| 세포 실험[2]: | |
| 세포 라인 | 쇠 동맥 내피세포 |
| 제조 방법 | 쇠 동맥 내피세포는 배양 후 3~5일 이내에 폴리카보네이트 멤브레인 클러스터 판에 융합된 단층을 얻었습니다. 세포는 혈소판 생성물과 혈소판 활성화제로 처리되었습니다. PPACK은 상단 구역에 추가되었습니다. 그런 다음 이러한 단층은 5% CO2 / 95% O2분위기에서 2시간 동안 숙화되었습니다. |
| 반응 조건 | 0.2 mM;2시간 |
| 응용 분야 | PPACK과의 공배양은 혈소파열효소에 의해 유도된 내피세포 허용도 증가를 59% 감소시켰습니다. |
세포 실험[3]: | |
세포 라인 | 인간 관절염 조화성 섬유세포(OASF) |
제조 방법 | 세포는 혈전효소(3 U/ml)로 처리되었으며, 혈전효소와 PPACK(30 nM)이 함께 24시간 동안 처리되었습니다. |
반응 조건 | 24시간; 30 nM |
응용 분야 | PPACK으로 세포를 사전 처리하면 혈전효소가 HO-1 표현을 강화하는 효과를 효과적으로 억제합니다. |
동물 실험[4]: | |
동물 모형 | 수컷 토끼 |
제조 방법 | PPACK은 식염수에서 준비되었고, 선량 한 볼 루스로 10-100 μg/kg 또는 0.25-1.0 μ g/kg/분의 속도로 투여되었습니다. 토끼는 혈전효소 투여 후 1분 전이나 후에 PPACK 선량를 받았거나, 혈전효소 투여 30분 전부터 PPACK을 0.1 밀리리터/분의 속도로 투여하여 1시간 동안 계속되었습니다. |
응용 분야 | PPACK 사전 처리는 토끼에서 혈전효소가 유도한 뇌 혈전 혈전증을 억제할 수 있습니다. |
참고문헌: [1]. Kovach IM, Kelley P, 등. 혈전효소가 소규모 억제제와 상호작용할 때의 프로тон 브리지를 연구한 논문. 생화학. 2009년 8월 4일; 48(30):7296-304. doi: 10.1021/bi900098s. PMID: 19530705; PMCID: PMC2800789. [2]. Rabbani LE, Johnstone MT, 등. PPACK이 혈소파열효소가 유도한 내피 무결성 변화를 완화시키는 논문. 혈전 연구. 1993년 6월 15일; 70(6):425-36. doi: 10.1016/0049-3848(93)90085-3. PMID: 8362368. [3]. Liu JF, Hou SM, 등. 혈전효소가 사람 관절 조직의 섬유세포에서 혈색소 산화효소-1을 표현하게 하는 것은 단백아효소 활성화 수용체 신호 전달 경로를 통해 이루어진다. 관절염 연구 및 치료. 2012년 4월 27일; 14(2):R91. doi: 10.1186/ar3815. PMID: 22541814; PMCID: PMC3446465. [4]. Liu JT, Paul W, 외.토끼 두개골 혈관에서의 혈전 유발 색전술에 대한 트롬빈 억제제와 항응고제.Eur J Pharmacol. 1994년 10월 24일; 264(2):183-90. doi: 10.1016/0014-2999(94)00464-1. PMID: 7851481. | |
| Cas No. | 71142-71-7 | SDF | |
| Synonyms | Pebac, D-Phenylalanyl-prolyl-arginyl Chloromethyl Ketone | ||
| Chemical Name | D-phenylalanyl-N-[(1S)-4-[(aminoiminomethyl)amino]-1-(2-chloroacetyl)butyl]-L-prolinamide, trifluoroacetate salt | ||
| Canonical SMILES | O=C([C@H](N)CC1=CC=CC=C1)N2[C@H](C(N[C@H](C(CCl)=O)CCCNC(N)=N)=O)CCC2 | ||
| Formula | C21H31ClN6O3 | M.Wt | 451 |
| Solubility | 20mg/mL in ethanol, 33mg/mL in DMSO, or in DMF | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.2173 mL | 11.0865 mL | 22.1729 mL |
| 5 mM | 443.5 μL | 2.2173 mL | 4.4346 mL |
| 10 mM | 221.7 μL | 1.1086 mL | 2.2173 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
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- SDS (Safety Data Sheet)
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