Epirubicin

Líneas celulares

Método de preparación

Las células U-87 de la línea celular de glioma humano se cultivaron en una incubadora de cultivo de tejidos estándar (37˚C; 5% CO₂; 95% de aire; 100% de humedad). Las células se pasaban regularmente mediante el tratamiento con tripsina (0.05%) y se cultivaban en el medio esencial mínimo de Eagle  (EMEM) complementado con un 10% de suero bovino fetal (FBS), penicillin y streptomycin, aminoácidos no esenciales, glucosa 1mg/ml y piruvato de 1mM. Las células U-87 y neuronales se latearon en microplacas de fondo plano de 96pozos a una densidad de 1×10⁴células/pocillo en medio de crecimiento completo de 100µl. Antes del tratamiento farmacológico, el medio de crecimiento se sustituyó por medio fresco que contenía un 2% de FBS. El U-87 y las células neuronales se expusieron a Epirubicin a concentraciones de 0.5-100µM. Después de 48h de incubación a 37˚C en una atmósfera humidificada del 5% de CO₂, se estimó el efecto citotóxico de Epirubicin utilizando un ensayo MTT. La síntesis de DNA en células proliferantes se evaluó midiendo la incorporación de bromodeoxiuridina (BRDU) utilizando un sistema ELISA de proliferación celular comercial. Los niveles de MMP-9 en los medios acondicionados de las células U-87 se determinaron utilizando un kit de inmunoensayo humano comercial de MMP-9. La migración de las células tumorales se evaluó utilizando el ensayo de curación de heridas. 

Condiciones de reacción

Áreas de aplicación

Modelos animales

Método de preparación

Los ratones BALB/c hembra (8 semanas, con un peso de 18 a 22g) fueron alojados en una cámara específica con condiciones de aire controladas (temperatura 20-25°C, humedad 50–65%) y libre acceso a alimentos y agua estériles. Se inyectó una suspensión celular 4T1 (100μL, 5×10⁶células/mL) por vía subcutánea en el lado derecho de la cuarta glándula mamaria de cada ratón. La longitud del tumor (L) y el ancho (W) se midieron cada dos días, y el volumen del tumor se calculó utilizando la siguiente fórmula: V (mm³)=(L×W²)/2. En el día 8 de la inyección de células 4T1, el tamaño de los tumores era de aproximadamente 100 mm³. Los ratones se dividieron al azar en dos grupos y aceptaron tratamientos cada dos días durante ocho veces : grupo  de control (Cont, n=8): los ratones recibieron, por ejemplo, solución salina y una inyección intravenosa de Epirubicin (2.5mg/kg). Los pesos de los ratones se recogió sangre y los ratones fueron sacrificados después de 16 días. Los tumores, corazones y otros tejidos se extirparon rápidamente y se pesaron. Varios tejidos se fijaron en formalina para la tinción de HE, el marcado del extremo de la muesca dUTP mediado por   TdT e inminohistoquímica, mientras que otros se congelaron en nitrógeno líquido y se almacenaron a −80°C para el análisis de transferencia occidental. 

Forma de dosificación

Áreas de aplicación

References:
[1] Wang XF, Zhao ZF, Chen MH, Yuan QH, Li YL, Jiang CL. Epirubicin inhibits growth and alters the malignant phenotype of the U87 glioma cell line. Mol Med Rep. 2015;12(4):5917-5923.
[2] Wu J, Xue X, Zhang B, et al. Enhanced antitumor activity and attenuated cardiotoxicity of Epirubicin combined with Paeonol against breast cancer. Tumour Biol. 2016;37(9):12301-12313.