Papain (≥800u/mg) |
Catalog No.GC33829
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Papain es una cisteína proteasa con una amplia especificidad, que escinde enlaces peptídicos de aminoácidos básicos, leucina o glicina.
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Cas No.: 9001-73-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Papain es una cisteína proteasa con una amplia especificidad, que escinde enlaces peptídicos de aminoácidos básicos, leucina o glicina. También hidroliza ésteres y amidas.
Papain no indujo proteólisis ni desprendimiento celular de HUVEC en un rango de concentración entre 0 y 25 µg/mL. Un tratamiento de cuatro horas con 10 µg/mL de papain resultó en una susceptibilidad reducida de las células endoteliales a la activación por VEGF, determinada por los niveles de fosforilación de Akt, MEK1/2, SAPK/JNK. Papain ejerció un efecto inhibidor distintivo sobre el crecimiento celular, la migración celular y la formación de tubos, con una inhibición de la formación de tubos detectable a concentraciones tan bajas como 1 µg/mL[4]. Papain activa los mastocitos humanos para liberar mediadores proinflamatorios a través de su actividad enzimática; papain es un activador directo tanto de los mastocitos cutáneos humanos (tejido conectivo) como de los CBMC (tipo mucoso) a través de su actividad proteasa y en parte a través de PAR-2 [5]. Aunque la afinidad por cGMP, la relación I-V, la cinética del canal y la amplitud de la corriente de un solo canal fueron casi las mismas en las preparaciones tratadas con papain y en los controles, la corriente total que fluye a través de la membrana de las células tratadas con papain se redujo a aproximadamente el 20% del control, lo que sugiere que papain redujo la densidad de los canales activados por cGMP[2]. Se observó un aumento significativo en la viabilidad celular cuando se usó papain para la aislación de RPC[3].
Papain es un alérgeno de cisteína proteasa con actividad adyuvante inherente, que induce una potente expresión de IL-4 por parte de las células T en los ganglios linfáticos poplíteos de ratones tras la inmunización en la almohadilla plantar. Las células B regulan posteriormente la respuesta inmune adaptativa al aumentar la expresión de ICOS en las células T CD4(+) y amplificar la inducción de células T helper foliculares y Th2. El bloqueo de anticuerpos del ligando ICOS, expresado por las células B de los ganglios linfáticos poplíteos, pero no por las células dendríticas, en el pico de la respuesta inhibe las respuestas de IL-4 en ratones salvajes pero no en ratones deficientes en células B. Por lo tanto, las células B juegan un papel crítico en la amplificación de la polarización Th2 dependiente de adyuvantes tras la adquisición e internalización no canónica de la cisteína proteasa papain[1]. Papain purificado de C. papaya fue efectivo contra los huevos y larvas de S. venezuelensis in vitro, sugiriendo su uso potencial como tratamiento alternativo para la estrongiloidiasis[7]. Una enfermedad articular de rápida progresión puede ser producida en el conejo mediante inyección intraarticular de papain concentrado[9]. Papain enzimáticamente activo induce preferentemente una respuesta IgG1 y resulta en desgranulación de mastocitos, ambas características típicas de una reacción alérgica en ratones[8].
References:
[1]. Dwyer DF, Woodruff MC, et,al. B cells regulate CD4+ T cell responses to papain following B cell receptor-independent papain uptake. J Immunol. 2014 Jul 15;193(2):529-39. doi: 10.4049/jimmunol.1303247. Epub 2014 Jun 13. PMID: 24928991; PMCID: PMC4203309.
[2]. Shen J, Watanabe S, et,al. Cell dissociation with papain reduces the density of cGMP-activated channels of the retinal rod. Jpn J Physiol. 1995;45(1):151-64. doi: 10.2170/jjphysiol.45.151. PMID: 7544417.
[3]. Scruggs BA, Jiao C, et,al. Optimizing Donor Cellular Dissociation and Subretinal Injection Parameters for Stem Cell-Based Treatments. Stem Cells Transl Med. 2019 Aug;8(8):797-809. doi: 10.1002/sctm.18-0210. Epub 2019 Apr 19. PMID: 31004408; PMCID: PMC6646699.
[4]. Mohr T, Desser L. Plant proteolytic enzyme papain abrogates angiogenic activation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) in vitro. BMC Complement Altern Med. 2013 Sep 21;13:231. doi: 10.1186/1472-6882-13-231. PMID: 24053149; PMCID: PMC3849051.
[5]. Seaf M, Ben-Zimra M, et,al. Papain Activates Human Mast Cells to Release Proinflammatory Mediators via its Enzymatic Activity. J Invest Dermatol. 2016 Jul;136(7):1523-1525. doi: 10.1016/j.jid.2016.03.030. Epub 2016 Apr 7. PMID: 27060447.
[6]. Moraes D, Levenhagen MA, et,al. In vitro efficacy of latex and purified papain from Carica papaya against Strongyloides venezuelensis eggs and larvae. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 2017 Apr 3;59:e7. doi: 10.1590/S1678-9946201759007. PMID: 28380118; PMCID: PMC5441158.
[7]. Moraes D, Levenhagen MA, et,al. In vitro efficacy of latex and purified papain from Carica papaya against Strongyloides venezuelensis eggs and larvae. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 2017 Apr 3;59:e7. doi: 10.1590/S1678-9946201759007. PMID: 28380118; PMCID: PMC5441158.
[8]. Chambers L, Brown A, et,al. Enzymatically active papain preferentially induces an allergic response in mice. Biochem Biophys Res Commun. 1998 Dec 30;253(3):837-40. doi: 10.1006/bbrc.1998.9862. PMID: 9918815.
[9]. Havdrup T, Telhag H. Papain-induced changes in the knee joints of adult rabbits. Acta Orthop Scand. 1977;48(2):143-9. doi: 10.3109/17453677708985125. PMID: 868495.
| Experimentos celulares [1]: | |
Líneas celulares | Células HUVEC |
Método de preparación | Las células se sembraron en placas de 12 pocillos y se incubaron con EGM para permitir la formación de monocapas. Después de 24 horas, el EGM fue reemplazado con EBM que contenía 2.5% de FCS, 10 ng/mL de VEGF y 10 µg/mL de papaína. Tras un periodo de incubación adicional de 10 horas, las células fueron teñidas con 2 µM de Calceína y se tomaron imágenes con un aumento de 4x utilizando un microscopio Nikon Eclipse Ti, el conjunto de filtros FITC del instrumento y una cámara Nikon Digital Sight DS-Fi1C. |
Condiciones de reacción | 10 µg/mL de papaína durante 10 horas. |
Áreas de aplicación | La papaína no indujo proteólisis ni desprendimiento de células HUVEC en un rango de concentración entre 0 y 25 µg/mL. Un tratamiento de 4 horas con 10 µg/mL de papaína resultó en una susceptibilidad reducida de las células endoteliales a la activación por VEGF, según lo determinado por los niveles de fosforilación de Akt, MEK1/2, SAPK/JNK. La papaína ejerció un efecto inhibidor distintivo sobre el crecimiento celular, la migración celular y la formación de tubos, siendo la inhibición de la formación de tubos detectable a concentraciones tan bajas como 1 µg/mL. |
| Experimentos con animales [2]: | |
Modelos animales | Ratones C57BL/6 |
Método de preparación | Los ratones C57BL/6 recibieron células B naïve por inyección intravenosa 24 horas antes de la toma de imágenes. Los ratones receptores fueron anestesiados con isoflurano al 2% y preparados en una tabla quirúrgica para la imagen en vivo de PLN. Se controlaron los PLN expuestos para el mantenimiento de la temperatura fisiológica y se capturaron imágenes utilizando un microscopio multiphotón Zeiss Bio-Rad Radiance 2100. Se inyectó papaína marcada con AF488 en la almohadilla plantar en el punto de tiempo 0, y se tomaron capturas seriadas de 150 µm de profundidad (pasos de 3 µm) cada 2 minutos durante 60 minutos después de la inyección de papaína. |
Forma de dosificación | Para microscopía intravital, los ratones fueron inyectados con 10 µl de papaína a una concentración de 10 mg/ml. |
Áreas de aplicación | La papaína, un alérgeno proteasa de cisteína con actividad adyuvante inherente, induce una potente expresión de IL-4 por parte de las células T en los ganglios linfáticos poplíteos de los ratones después de la inmunización en la almohadilla plantar. Las células B regulan posteriormente la respuesta inmune adaptativa al aumentar la expresión de ICOS en las células T CD4(+) y amplificar la inducción de células T helper tipo 2 (Th2) y células T foliculares helper. El bloqueo con anticuerpos del ligando de ICOS, expresado por las células B de los ganglios linfáticos poplíteos, pero no por las células dendríticas, en el pico de la respuesta inhibe las respuestas de IL-4 en ratones salvajes pero no en ratones deficientes en células B. Así, las células B juegan un papel crítico en la amplificación de la polarización Th2 dependiente de adyuvantes tras la adquisición e internalización no canónica de la proteasa de cisteína papaína. |
Referencias: [1]. Mohr T, Desser L. La enzima proteolítica vegetal papaína abroga la activación angiogénica de las células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC) in vitro. BMC Complement Altern Med. 2013 Sep 21;13:231. doi: 10.1186/1472-6882-13-231. PMID: 24053149; PMCID: PMC3849051. [2]. Dwyer DF, Woodruff MC, et al. Las células B regulan las respuestas de las células T CD4+ a la papaína después de la captación de papaína independiente del receptor de células B. J Immunol. 2014 Jul 15;193(2):529-39. doi: 10.4049/jimmunol.1303247. Epub 2014 Jun 13. PMID: 24928991; PMCID: PMC4203309. | |
| Cas No. | 9001-73-4 | SDF | |
| Canonical SMILES | [Papain] | ||
| Formula | M.Wt | ||
| Solubility | Water : 50 mg/mL (Need ultrasonic);DMSO : 5 mg/mL (Need ultrasonic) | Storage | Store at 2-8°C |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Biological Activity: 803u/mg Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
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