Phleomycin es un antibiótico glicopéptido y un inductor de rotura de hebras de DNA (DNA-SB) que se puede utilizar para seleccionar células genéticamente diseñadas[1]. Phleomycin es una molécula que se encuentra en Streptomyces, y similar a la bleomicina, puede unirse e insertarse en el DNA, interrumpiendo la integridad de la estructura de la doble hélice[2]. Phleomycin tiene un efecto mutagénico en las cepas resistentes de Streptococcus[3].
In vitro, el tratamiento de células HeLa con Phleomycin (100-400μg/mL) durante 0-24h inhibió la proliferación celular de una manera dependiente del tiempo y la dosis, indujo la citotoxicidad, indujo la liberación inicial de citocromo c, la regulación a la baja de Bcl-XL, ENDOG, DAXX y MDM2, y la regulación positiva de CASP yd BID[4]. El tratamiento de las células de Nannochloropsis oceanica con Phleomycin (0.2μg/mL) durante 48 horas causó roturas aleatorias de doble cadena en el DNA de las células algas y aumentó la eficiencia de transformación del gen de resistencia activa a la hygromycin B (aph7)[5]. El tratamiento con Phleomycin (0-200ng/mL) de embryonic fibroblasts de ratón (MEFs) de diferentes mutantes durante 48 horas redujo significativamente la tasa de supervivencia de los MEFs que carecen de XRCC4, DNA-Ligase IV o Xlf, pero no tuvo un efecto significativo en los MEFs de mutantes PAXX y MEFs de tipo salvaje[6].
References:
[1] Ma X, Pan K, Zhang L, et al. Genetic transformation of Nannochloropsis oculata with a bacterial phleomycin resistance gene as dominant selective marker[J]. Journal of Ocean University of China, 2016, 15: 351-356.
[2] Stokowa-Sołtys K, Dzyhovskyi V, Wieczorek R, et al. Phleomycin complex–Coordination mode and in vitro cleavage of DNA[J]. Journal of inorganic biochemistry, 2019, 195: 71-82.
[3] Van Peer A F, De Bekker C, Vinck A, et al. Phleomycin increases transformation efficiency and promotes single integrations in Schizophyllum commune[J]. Applied and Environmental Microbiology, 2009, 75(5): 1243-1247.
[4] Hwang J, Kim Y Y, Huh S, et al. The Time‐Dependent Serial Gene Response to Zeocin Treatment Involves Caspase‐Dependent Apoptosis in HeLa Cells[J]. Microbiology and immunology, 2005, 49(4): 331-342.
[5] Zhang Z, Guo L, Liu H, et al. Zeocin treatment significantly elevated transformation efficiency of Nannochloropsis oceanica[J]. Journal of Applied Phycology, 2022, 34(3): 1587-1594.
[6] Abramowski V, Etienne O, Elsaid R, et al. PAXX and Xlf interplay revealed by impaired CNS development and immunodeficiency of double KO mice[J]. Cell Death & Differentiation, 2018, 25(2): 444-452.