DMPO (Synonyms: 5,5Dimethyl1PyrrolineNOxide) |
Catalog No.GC13957
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DMPO(5,5-디메틸-1-피롤린-N-옥사이드)는 냉각온도에서도 전자자기공명(ESR) 기술을 사용하여 생물학적 시스템의 산소 중심의 자유질자를 측정하는 데 사용할 수 있는 수용성 아지트로스산 스핀 트랩이다.
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Cas No.: 3317-61-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
DMPO(5,5-디메틸-1-피롤린-N-옥사이드)는 냉각온도에서도 전자자기공명(ESR) 기술을 사용하여 생물학적 시스템의 산소 중심의 자유질자를 측정하는 데 사용할 수 있는 수용성 아지트로스산 스핀 트랩이다. 스핀 트랩은 자유질자와 반응하여 추가 연구가 가능한 안정적인 첨가물을 형성한다 [2]. DMPO는 수용성이 있고 빨리 지질 이중막을 침투하며 독성이 낮으며,체외 실험 및 체내 실험에서 사용할 수 있다 [3, 4].
체외 실험에서 RAW 264.7 매크로팽세포에 50 mM DMPO를 24시간 처리한 결과, 항염증활성이 나타났으며, 유도형 아지트산 산소화효소(iNOS)의 표현이 감소하였고 MAPK, Akt 및 IκBα의 인산화를 억제하고, NF-κB p65 이동을 감소시켰다[5].
체내 실험에서 복강내 주사로 10-100 mg/kg의 DMPO를 투여한 결과 폼멀린 유도된 고통증에 대한 진통 효과가 나타났다[6].
References:
[1] Wang P, Zweier J L. Measurement of nitric oxide and peroxynitrite generation in the postischemic heart: evidence for peroxynitrite-mediated reperfusion injury[J]. Journal of Biological Chemistry, 1996, 271(46): 29223-29230.
[2] Bačić G, Spasojević I, Šećerov B, et al. Spin-trapping of oxygen free radicals in chemical and biological systems: new traps, radicals and possibilities[J]. Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, 2008, 69(5): 1354-1366.
[3]West M B, Rokosh G, Obal D, et al. Cardiac myocyte–specific expression of inducible nitric oxide synthase protects against ischemia/reperfusion injury by preventing mitochondrial permeability transition[J]. Circulation, 2008, 118(19): 1970-1978.
[4]Qin X, Wu C, Niu D, et al. Peroxisome inspired hybrid enzyme nanogels for chemodynamic and photodynamic therapy[J]. Nature Communications, 2021, 12(1): 5243.
[5]Zhai Z, Gomez-Mejiba S E, Zhu H, et al. The spin trap 5, 5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide inhibits lipopolysaccharide-induced inflammatory response in RAW 264.7 cells[J]. Life sciences, 2012, 90(11-12): 432-439.
[6]Chung W S, Go Y G, Lee W H. Antinociceptive effect of intraperitoneally administered 5, 5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide on formalin induced nociception in rats[J]. Korean J Anesthesiol, 2008, 54(3).
이 계획은 가이드만 제공하며, 구체적인 요구 사항에 맞게 수정해 주세요.
용액 조제
(1) 작업 용액: 실험 버퍼에 DMPO를 녹여 최종 농도 1 M으로 만듭니다. 0.22μm 필터 필름으로 걸러줍니다.
참고: 실제 상황에 따라 최적의 작업 농도를 조정하거나 문헌을 참고하여 스스로 그레이든트 농도를 설정해 주세요. 작업 용액은 반드시 즉시 준비하고 사용해야 합니다.
2. DMPO를 사용한 체내 산소 자유질자의 탐지[1, 2] (문헌에서, 참고용)
(1) 펜토바바르비탈 나트륨 (5 mg)을 사용하여 복강내 마취를 유도합니다. 심장을 제거하고 상승 대동맥 캔늘에 연결하여 일정한 유속 (2 mL/min)으로 Krebs-Henseleit buffe를 주입합니다.
(2) 혈액 공급 중단 후, 100μM의 이에틸렌트리아민펜타에틸렌산 (DTPA)을 포함하는 버퍼에 DMPO를 녹여 최종 농도를 1 M로 만듭니다. 재주입 중에 즉시 심장에 가까운 측벽을 통해 100μL/min의 속도로 트랩을 주입합니다.
(3) 재주입 중에 지정된 시간 간격으로 정기적으로 배수액을 수집하여 5분 동안 재관류할 때까지 합니다. 샘플을 수집한 후 즉시 각각의 테이블을 액체질소에 냉동합니다.
(4) 스펙트로메터를 사용하여 DMPO에 의해 포착된 산소 자유질자의 신호를 탐지하고 기록합니다.
3. DMPO를 사용한 체외 히드록시 자유기 탐지[3] (문헌에서, 참고용)
(1) 1 mL 샘플에 다양한 농도의 Fe3O4 용액을 추가합니다. 각 샘플에 10 μL DMPO 작업 용액을 자유질 제거제로 추가합니다. 37°C에서 샘플을 6시간 동안 배양하여 반응이 완전히 이루어지도록 합니다. 1 mL PBS에 10 μL DMPO 작업 용액을 반응 용액의 대조군으로 추가합니다.
(2) 0.22 µm 필터를 사용하여 반응 혼합물을 걸러 겉질 및 큰 입자를 제거합니다.
(3) 스펙트로메터를 사용하여 DMPO에 의해 포착된 히드록시 자유질자의 신호를 탐지하고 기록합니다.
참고: 이 프로토콜은 DMPO를 사용하여 체내 및 체외에서 산소 중심의 자유질자를 탐지하기 위한 가이드를 제공합니다. 다른 문헌 및 구체적인 실험 요구 사항에 따라 조정할 수 있습니다.
참고문헌:
[1]West M B, Rokosh G, Obal D, et al. Cardiac myocyte–specific expression of inducible nitric oxide synthase protects against ischemia/reperfusion injury by preventing mitochondrial permeability transition[J]. Circulation, 2008, 118(19): 1970-1978.
[2]Wang P, Chen H, Qin H, et al. Overexpression of human copper, zinc-superoxide dismutase (SOD1) prevents postischemic injury[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 1998, 95(8): 4556-4560.
[3]Qin X, Wu C, Niu D, et al. Peroxisome inspired hybrid enzyme nanogels for chemodynamic and photodynamic therapy[J]. Nature Communications, 2021, 12(1): 5243.
| Cas No. | 3317-61-1 | SDF | |
| Synonyms | 5,5Dimethyl1PyrrolineNOxide | ||
| Chemical Name | 2,2-dimethyl-3,4-dihydro-2H-pyrrole 1-oxide | ||
| Canonical SMILES | [O-][N+]1=CCCC1(C)C | ||
| Formula | C6H11NO | M.Wt | 113.16 |
| Solubility | H2O : ≥ 100 mg/mL (883.70 mM) DMSO : 100 mg/mL (883.70 mM; Need ultrasonic) | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 8.837 mL | 44.1852 mL | 88.3704 mL |
| 5 mM | 1.7674 mL | 8.837 mL | 17.6741 mL |
| 10 mM | 883.7 μL | 4.4185 mL | 8.837 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
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- Purity: >97.00% Appearance: Solid-liquid mixture
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- SDS (Safety Data Sheet)
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