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Laminin (925-933)(CDPGYIGSR)은 라미닌 B1 체인의 시퀀스이다. YIGSR은 다양한 상피세포의 착착성을 촉진하는 데 활성적이다[1].Laminin은 콜라겐 IV, 헴산산화 프로테오글리칸 및 니도겐-엔택틴과 결합하고, 이 매트릭스와의 세포 상호작용을 조절한다[2].
Laminin에서 파생된 합성 펩타이드인 Cys-Asp-Pro-Gly-Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg-NH2 (CDPGYIGSR-H2)는 세포 결합을 위한 활성 사이트를 포함하고 있으며, 혈관 생성과 실체 종양 성장을 모두 억제한다[3].
체외 실험에서 농도가 100 및 300 µg/ml일 때, Laminin (925-933)은 HT-1080 및 CHO 세포가 셀 컬처 플레이트에 부착하는 것을 자극할 수 있다[2].
체내 실험에서 아가로즈 갤로와 공价 결합된 짧은 펩타이드 영역 Laminin (925-933)은 생체공학 3차원 기질로서 성공적으로 등뼈신경절 (DRG)의 신경 돋움을 지원했다[2]. 체외 실험에서 Laminin (925-933)을 포함하는 필름에서 세포 착착이 78% 감소한 것으로 관찰되었다[4].
체내 실험에서 Laminin (925-933) 변형된 갤은 비변형 갤, Laminin (925-933) 갤, 그리고 생리염으로 채워진 신경 안내 채널에 비해 절단된 쥐 등뼈신경 모델에서 신경 재생을 촉진하는 능력을 나타냈다[3].
References:
[1] Graf J, et al. A pentapeptide from the laminin B1 chain mediates cell adhesion and binds the 67,000 laminin receptor. Biochemistry. 1987 Nov 3;26(22):6896-900.
[2] Graf J, et al. Identification of an amino acid sequence in laminin mediating cell attachment, chemotaxis, and receptor binding. Cell. 1987 Mar 27;48(6):989-96.
[3] Borkenhagen M, et al. Three-dimensional extracellular matrix engineering in the nervous system. J Biomed Mater Res. 1998 Jun 5;40(3):392-400.
[4] Ranieri JP, et al. Spatial control of neuronal cell attachment and differentiation on covalently patterned laminin oligopeptide substrates. Int J Dev Neurosci. 1994 Dec;12(8):725-35.
실험 프로토콜 (Protocol)
Laminin 코팅된 셀 컬처 플레이트:
코팅 실험을 위해, 모든 laminin 제제는 멸균 PBS에서 재해석되고 PBS에서 10 μg/ml로 희석되었다. 각 laminin 제제는 6웰 플레이트에 6시간 동안 실온에서 흡착되었다. 비특이 결합 지점은 실온에서 0.1% w/v BSA를 포함한 PBS로 30분 동안 차단되었다. Laminin 코팅된 플레이트에 세포를 심기 전에, 플레이트는 DMEM으로 세척되었다.
이 프로토콜은 지침만 제공하며, 특정 요구 사항에 따라 수정되어야 한다.
참조 문헌:
[1] Tran T 등. 인간 기도 원활 근세포의 성숙을 위해서는 내원성 라미닌이 필요한다. 호흡 연구. 2006년 9월 12일;7(1):117.
제품 문서 (Product Documents)
화학적 특성 (Chemical Properties)
저장 용액은 -80°C 보관 시 6개월 이내, -20°C 보관 시 1개월 이내에 사용하십시오.
용해도를 높이려면 튜브를 37°C로 데운 뒤 적절한 시간 동안 초음파 처리하십시오.
계산 도구 (Calculators)몰 농도 / 희석 / 분자량 / 단위 변환 / 생체 내 제형 / 용해도
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