Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC |
Catalog No.GA23560
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Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC es un sustrato fluorogénico muy sensible para la prolyl oligopeptidase, mejor conocida como POP. Sus longitudes de onda de excitación y emisión son Ex/Em=380nm/460nm.
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Cas No.: 72698-36-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC es un sustrato fluorogénico muy sensible para la prolyl oligopeptidase, mejor conocida como POP. Sus longitudes de onda de excitación y emisión son Ex/Em=380nm/460nm[1]. Se ha empleado para comprobar la capacidad de la POP de Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC has been used to detect the ability of Schistosoma mansoni (SmPOP) de hidrolizar sustratos que llevan prolina en la posición P1. También sirve para los inhibidores específicos de esta SmPOP[2]. Y aún hay más, con él se han calculado los parámetros de dinámica molecular de la POP de Mycobacterium tuberculosis (POPMt). Asimismo permite analizar cómo afectan el pH y la temperatura a su estructura y a la actividad enzimática[3].
| Experimento [1]: | |
Muestra | Plasma humano |
Método de preparación | En cada reacción con un volumen total de 100 μl de solución, se añadieron 20 μl de plasma humano al tampón de ensayo que consistía en 20 mM Tris/HCl, pH 8.0, 0.1 M NaCl y 1 mM EDTA. Se añadió el sustrato (Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC) a una concentración final de 20 μM. Las muestras se incubaron a 37 °C y la fluorescencia se registró utilizando un fluorómetro de microplacas con una longitud de onda de excitación de 360 nm y una longitud de onda de emisión de 460 nm. |
Condiciones de reacción | 20 μM Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC |
Áreas de aplicación | La actividad de FAP en el plasma humano se midió utilizando un pentapéptido succinilado compuesto por Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC, que contiene dos sitios de corte para FAP. Solo la escisión entre el último residuo de prolina y el grupo AMC libera el grupo AMC fluorescente, lo que da como resultado una lectura de fluorescencia. La actividad de FAP de las muestras medidas varía de 1.3 a 7 nM/min/μL. |
| Experimento con células [2]: | |
Líneas Celulares | Clones de células MC3T3-E1 |
Método de preparación | Se cultivaron muestras de 5 x 10⁴ células en placas de plástico de 35 mm durante 5 días. Después de lavar los cultivos con tampón fosfato libre de Ca+2 y Mg+2 (pH 7.2), se rasparon de las placas y se homogeneizaron en el mismo tampón utilizando un homogeneizador de vidrio-teflón. El homogeneizado se utilizó para el ensayo de las actividades de Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMCase y DAP. |
Condiciones de Reacción | 30 μl de 2 mM Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC a 37°C durante 90 minutos |
Áreas de aplicación | Al examinar las actividades de la peptidasa similar a colagenasa (Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMCase) y dipeptidil aminopeptidasa (DAP) en MC3T3-E1 en osteoblastos recién clonados con capacidad osteogénica, se observó que la Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMCase en MC3T3-E1 fue inhibida por metales pesados (Zn+2 y Cu+2), y algunos reactivos (Mn+2, Ca+2, Mg+2 y EDTA) aumentaron la actividad enzimática; especialmente, Mn y EDTA aumentaron la actividad de Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMCase 8.2 veces y 23 veces respectivamente. |
Referencias: [1]. Zhen EY, Jin Z, et al. Circulating FGF21 proteolytic processing mediated by fibroblast activation protein. Biochem J. 2016 Mar 1;473(5):605-14. doi: 10.1042/BJ20151085. Epub 2015 Dec 3. PMID: 26635356; PMCID: PMC4764976. [2]. Chikuma, T., Ishii, Y., Kato, T. et al. Properties of Suc-GPLGP-MCAase and dipeptidyl-aminopeptidase in mouse calvaria-derived osteoblastic cells (MC3T3-E1). Calcif Tissue Int 37, 183–188 (1985). https://doi.org/10.1007/BF02554839 | |
| Cas No. | 72698-36-3 | SDF | |
| Formula | C34H44N6O10 | M.Wt | 696.76 |
| Solubility | Soluble in DMSO | Storage | Store at -20°C |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.4352 mL | 7.1761 mL | 14.3521 mL |
| 5 mM | 287 μL | 1.4352 mL | 2.8704 mL |
| 10 mM | 143.5 μL | 717.6 μL | 1.4352 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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